骨髓间充质干细胞体外转化为神经细胞的环境特征

• 作者: 刘卓 徐运 杨振军 陈蕾
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓细胞 细胞培养 神经元 干细胞
• 年，卷（期）: 2007,（50）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 10044-10048
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6008字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.50.025

摘要

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养条件,体外定向诱导传代骨髓间充质干细胞向神经干细胞转化并进一步向神经细胞分化的环境,并对分化的神经元进行鉴定.方法:实验于2005-08/2007-03在南京大学医学院附属鼓楼医院科研部完成.①选用健康SD大鼠,分离纯化并培养大鼠骨髓间充质干细胞.②应用流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达,通过免疫表型鉴定骨髓间充质干细胞.③贴壁培养诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,分为对照组和诱导剂组,对照组中不加诱导剂,诱导剂组分两步诱导:首先加入含终浓度均为10 μg/L的表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子诱导分化剂,连续培养12 d;然后应用20 μg/L的脑源性神经营养因子和1 μmol/L的全反式维甲酸继续诱导6 d,分别收集诱导1 d,6 d,12 d,18 d的细胞进行细胞免疫荧光鉴定.结果:①传代第3代骨髓间充质干细胞为梭形成纤维样细胞,均一稳定的表达与间充质干细胞相关的表面抗原标记物CD29,CD44,CD90,阳性率分别为98.88%,96.90%,95.86%,但极少表达造血细胞标志CD34.②经碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子诱导12 d后诱导剂组巢蛋白阳性表达率为(89.24±2.12)%,而对照组细胞未表达巢蛋白.③经脑源性神经营养因子和全反式维甲酸联合诱导6 d后,诱导剂组均可见微管相关蛋白2阳性细胞,大部分细胞转变为神经元样细胞形态;对照组微管相关蛋白2阴性,细胞形态仍为梭形成纤维样细胞.结论:实验采用并改良了全骨髓贴壁法,操作简单快速,细胞活性好,是一种较为理想的分离和纯化骨髓间充质干细胞的方法.骨髓间充质干细胞可分化成神经干细胞,进一步诱导分化为神经细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐运	南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科	140	640	12.0	18.0
2	陈蕾	南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科	7	58	5.0	7.0
3	杨振军	南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科	4	24	3.0	4.0
4	刘卓	南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科	15	72	6.0	8.0