血管紧张素Ⅱ受体2在小鼠早期肾脏发育中的表达

• 作者: 于嵩 李晓明 郭敏
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 血管紧张素Ⅱ 肾小管 蛋白 细胞
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1481-1484,插3
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5418字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.08.038

摘要

目的:观察血管紧张素Ⅱ受体2在小鼠早期肾脏发育中的表达及其与肾脏发育的关系.方法:实验于2006-06/10在辽宁医学院科学实验中心与组织胚胎学实验室完成.选取24只健康昆明小白鼠,雌、雄各半.按雌雄比例1∶1同窝饲养,采用检查阴道栓脱落的方法确定雌鼠受孕时间.以观察到阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0 d.分别取胚龄14,16,18 d胎鼠和生后1,3,7 d龄仔鼠肾脏,每组4只.孕鼠经乙醚麻醉后剖腹取出胎鼠,胚龄14,16,18 d全肾固定.仔鼠经乙醚麻醉后,于腹后壁取出肾脏,用排刀法沿横轴将肾脏切开,入100 g/L中性甲醛固定,系列乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡定向包埋,做厚5 μm连续切片.①将切片用血管紧张素Ⅱ受体2抗体进行染色,稀释度为1∶100,染色步骤按免疫组化试剂盒说明书进行.②采用体视学方法测定血管紧张素Ⅱ受体2在肾小球及肾小管处阳性细胞的体密度(Vv=∑Px/∑Pc),测算出各胚(d)龄小鼠各期皮质内的Vv值,∑Px为方格系统落在肾小体及肾小管内血管紧张素Ⅱ受体2阳性细胞的点数,∑Pc为方格系统落在参照系(相应的各期肾小体和肾皮质)的点数.③各组小鼠取右肾,加入4倍体积的裂解液,粉碎,离心收集上清,用免疫印记分析法测定总蛋白含量.结果:①血管紧张素Ⅱ受体2表达在生肾区的肾小体、输尿管芽及间充质,孕16 d除在生肾区外开始出现在肾小管,且随着肾小体的逐渐成熟表达量降低.孕18 d随着生肾区面积的减少表达量降低,而在肾小管的表达量有所增加;生后随着生肾区的进一步减小,表达量进一步降低,到生后7 d时只有微量表达,生后1 d在肾小管表达减少,生后3 d没有表达.②血管紧张素Ⅱ受体2在孕16 d时开始表达在肾小管,阳性细胞体密度为(11.17±2.01)%,孕18 d达到(19.19±3.46)%,生后1 d为(5.18±1.56)%.生后3 d没有表达.Ⅰ期肾小体内血管紧张素Ⅱ受体2的阳性细胞体密度为(57.88±8.77)%.Ⅱ期血管紧张素Ⅱ受体2阳性细胞体密度为(51.47±5.26)%,进入Ⅲ期肾小体时,血管紧张素Ⅱ受体2阳性表达明显减少(22.41±3.46)%,Ⅳ期肾小体内(17.17±3.09)%,Ⅴ期肾小体血管紧张素Ⅱ受体2阳性表达基本消失(6.28±2.80)%.③血管紧张素Ⅱ受体2蛋白表达随着胚龄的增加含量逐渐降低,生后降低明显.结论:血管紧张素Ⅱ受体2在胚胎期大量表达在生肾区的输尿管芽和肾小体,在间充质及肾小管也有表达,生后表达量迅速降低,说明血管紧张素Ⅱ受体2对肾脏各结构的发育起着非常重要的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭敏	辽宁医学院组胚教研室	98	150	5.0	8.0
2	李晓明	辽宁医学院组胚教研室	33	40	3.0	3.0
3	于嵩	辽宁医学院组胚教研室	2	1	1.0	1.0