携EGFP的人低氧诱导因子-1α真核表达载体的构建及表达

• 作者: 吴平生 王月刚 童锴 胡英芳 谢宜军
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 低氧诱导因子-1α 绿色荧光蛋白 真核表达载体 基因治疗
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 554-557
• 页数: 4页
• 分类号: R541.4|R394.3
• 字数: 2722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2007.05.011

摘要

目的 构建携EGFP的人低氧诱导因子(HIF-1α)真核表达载体,为研究人HIF-1α基因对冠心病的血管新生作用奠定基础.方法 采用分子克隆技术,KpnⅠ、XbaⅠ双酶切pcDNA3.1/V5-HisA-HIF-1α获得HIF-1αcDNA,克隆到质粒pcDNA3.1(+),得到质粒pcDNA3.1(+)-HIF-1α,以Kpn Ⅰ,Apa Ⅰ双酶切质粒pcDNA3.1(+)-HFI-1α获得HIF-1αcDNA,克隆到质粒pEGFP-c1得到pEGFP-HIF-1α-c1质粒.脂质体法转染HEK293细胞,用荧光显微镜和Western blottign检测EGFP和HIF-1α在HEK293细胞的表达.均显示融合蛋白在细胞中表达.结果 经酶切鉴定及PCR证实重组pEGFP-HIF-1α-c1质粒构建成功,荧光显微镜和Western blotting显示EGFP和HIF-1α融合蛋白在HEK293细胞中表达.结论 成功构建重组真核表达载体pEGFP-HIF-1α-c1并在HEK293细胞表达,为冠心病的HIF-1基因治疗研究奠定更直观的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴平生	南方医科大学南方医院心内科	131	614	13.0	18.0
2	王月刚	南方医科大学南方医院心内科	48	237	8.0	12.0
3	谢宜军	南方医科大学南方医院心内科	9	33	3.0	5.0
4	胡英芳	南方医科大学南方医院心内科	8	32	4.0	5.0
5	童锴	南方医科大学南方医院心内科	7	22	3.0	4.0