摘要:
背景:利用组织工程技术将前脂肪细胞在体外与生物支架粘附培养后进行细胞移植中首先要解决支架材料与细胞的生物相容性问题.目的:探讨聚β-羟基丁酸脂支架材料用于前脂肪细胞移植的可行性.设计:随机对照实验.材料:实验于2003-10/2005-06在武汉大学医学院完成,选用12只雄性SD大鼠,体质量200~250 g,由武汉大学医学院实验动物中心提供.聚β-羟基丁酸酯支架材料由清华大学化工系高分子材料研究所提供.方法:将大鼠的前脂肪细胞分离,体外纯化培养备用,将聚β-羟基丁酸酯支架材料制成0.75 cm×0.75 cm×0.2 om大小的片状,经含有150 g/L胎牛血清DMEM/F12培养液浸泡并置于培养板内,每孔1片,共12孔,每孔内加入培养好的细胞悬液1.0 mL形成细胞生物支架复合体.取8只大鼠,将制成的复合体手术植入大鼠右侧背部皮下组织并用5-0丝线固定为细胞支架组,以相同方式将未粘附细胞的生物支架植于同一大鼠左侧背部皮下组织内为空白支架组.每侧各植入1片,8周后取材,观察移植物外观及结构变化并测量其重量和体积.4只大鼠植入其余4片细胞生物支架,植入3周取出,经100 g/L中性甲醛固定后,苏木精-伊红染色,切片,观察其组织学变化.主要观察指标:①细胞支架组与空白支架组移植物大体与组织学观察结果.②两组移植物体积及质量比较.结果:纳人大鼠12只均进入结果分析.①细胞支架组与空白支架组移植物大体观察结果:细胞支架组植入片外观呈肉红色,周边有包膜形成,可见新生细小血管长人材料内.空白支架组外观为灰白色,外被包膜.②两组移植物苏木精-伊红染色观察结果:3周后细胞支架组移植物周边有少许散在脂肪细胞,血管数较少,8周后复合体周边为薄层纤维包膜,可见脂肪细胞由支架周边向内长人并伸人支架内,有的部分几乎被脂肪细胞充满,并见有较多血管形成;空白支架组仅见包膜及血管,支架内充满纤维结缔组织,未见脂肪细胞生长.③两组移植物体积及质量比较结果:细胞支架组支架体积大于空白支架组[(257.5±70.2),(144.6±62.6)mm3,P<0.01],质量大于空白支架组[(245.6±58.2),(148.7±60.3)mg,P<0.01].结论:前脂肪细胞可在聚β-羟基丁酸酯支架上粘附,增殖并分化为成熟的脂肪细胞,聚β-羟基丁酸酯材料作为前脂肪细胞的移植载体是可行的.