人近端肾小管上皮细胞上表达黏附分子CD146与细胞的增殖生长状态

• 作者: 倪培华 汪年松 王锋 范瑛
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞粘附分子 肾小管 上皮细胞 组织构建
• 年，卷（期）: 2007,（27）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 5364-5368
• 页数: 5页
• 分类号: R329
• 字数: 6517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.27.029

摘要

目的:观察正常人近端肾小管上皮细胞(HK2)是否表达黏附分子CD146,初步探讨CD146与肾小管上皮细胞的关系及其生理意义.方法:实验于2005-05/2006-02在上海交通大学医学院临床检验系实验室完成.①实验材料:人近端肾小管上皮细胞株(HK2,由中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所惠赠).②实验干预:体外培养的HK2连续观察72 h.③实验评估:采用倒置显微镜、光学显微镜下观察肾小管上皮细胞的形态;用反转录-聚合酶链反应方法检测CD146 mRNA的表达;流式细胞仪和免疫荧光法测定CD146蛋白质的表达及其定位;进一步在培养细胞的上清液中检测CD146的可溶性形式(sCD146).结果:①肾小管上皮细胞的形态学观察和鉴定:传代培养的HK2三四天融合后呈铺底,相关抗原检测抗人keratin阳性,抗Ⅷ因子相关抗原阴性.②CD146 mRNA水平的表达:HK2在培养早期(24 h)即表达CD146 mRNA(0.092±0.012),但延长细胞的培养时间似乎并没有进一步改变CD146 mRNA的表达水平(0.097±0.005,0.113±0.015,P＞0.05).③CD146蛋白质水平的表达和定位:CD146不仅位于肾小管上皮细胞膜上,而且在细胞核和胞浆中也有表达.体外培养的HK2相互融合时,位于细胞膜上的CD146表达增强,呈线性、持续性地表达于细胞-细胞间的连接部位,同时胞内的CD146标记也相应增强.④细胞上清液中sCD146的检测:HK2上清液中存在CD146的可溶性形式(sCD146).培养细胞观察24～72 h,sCD146水平在48 h升高[(18.00±0.80)μg/L],到72 h达到高峰[(29.33±1.22)μg/L],与24 h[(13.87±0.46)μg/L]比较,差异均有显著性意义(P＜0.05).结论:人近端肾小管上皮细胞组成性地表达CD146,是肾小管上皮细胞新的生物学标志;CD146在细胞内外的表达强度有赖于细胞间联系的建立和细胞增殖的程度,CD146在促进细胞生长和维持组织完整性等方面发挥重要作用.肾小管上皮细胞上清液中存在CD146的可溶性形式,sCD146在一定程度上也反映了细胞的生长和增殖状况.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪年松	上海交通大学附属第六人民医院肾内科	347	2116	20.0	30.0
2	倪培华	上海交通大学医学院检验系	104	442	10.0	13.0
3	王锋	上海交通大学附属第六人民医院肾内科	123	997	16.0	26.0
4	范瑛	上海交通大学附属第六人民医院肾内科	31	161	7.0	11.0