微球培养人脂肪间充质干细胞向软骨细胞的诱导分化

• 作者: 叶川 周全 张胜利 朱勇 李宝军 邓展生 郭晓柠
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 组织工程 脂肪间充质干细胞 软骨细胞 诱导
• 年，卷（期）: 2007,（33）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 6694-6696
• 页数: 3页
• 分类号: R394.2
• 字数: 3465字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.33.036

摘要

目的:观察微球培养的人脂肪间充质干细胞在特定诱导条件下向软骨细胞的分化情况,探讨其作为组织工程化软骨种子细胞的可行性.方法:实验于2006-03/08在湘雅医院中心实验室完成.①实验材料:皮下脂肪组织来源于股骨颈骨折手术患者6例,对本实验均知情同意.②实验方法:取皮下脂肪,分离培养脂肪间充质干细胞,胰酶消化,取传至第6代的细胞,密度调整为1×1010 L-1进行接种培养,细胞贴附后加入软骨细胞诱导剂(含10 μg/L转化生长因子β1、37.5 mg/L维生素C、6.25 mg/L胰岛素、6.25 mgL转铁蛋白、10-4 mol/L地塞米松、1%新生牛血清的高糖DMEM),倒置显微镜下观察细胞团的变化.③实验评估:诱导14 d后,将细胞吹散,细胞爬片,免疫组化染色检测Ⅱ型胶原的表达,甲苯胺兰染色观察细胞内异染情况,RT-PCR检测Ⅱ型胶原蛋白和软骨蛋白聚糖aggrecan mRNA的表达.结果:①脂肪间充质干细胞向软骨细胞诱导后的形态:诱导3 d后,细胞团向内呈放射状聚集.②诱导后Ⅱ型胶原的表达及细胞内异染情况:诱导14 d后,Ⅱ型胶原在胞浆、胞膜及细胞外基质中均有表达,呈棕黄色;甲苯胺兰染色显示胞浆内呈蓝色异染.③诱导前后Ⅱ型胶原蛋白和aggrecan mRNA的表达:诱导前脂肪间充质干细胞无Ⅱ型胶原蛋白和aggrecan mRNA表达,而诱导14 d后二者均有较高表达.结论:在微球状态下可成功诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱勇	中南大学湘雅医院脊柱外科	64	352	10.0	14.0
2	周全	中南大学湘雅医院脊柱外科	13	48	4.0	6.0
3	邓展生	中南大学湘雅医院脊柱外科	150	1019	15.0	23.0
4	李宝军	中南大学湘雅医院脊柱外科	21	117	7.0	10.0
5	叶川	中南大学湘雅医院脊柱外科	5	20	2.0	4.0
6	张胜利	中南大学湘雅医院脊柱外科	15	87	7.0	9.0
7	郭晓柠	中南大学湘雅医院脊柱外科	21	112	7.0	9.0