整合素β4结合蛋白与P311在人胚肾293细胞中的表达及共定位

• 作者: 吴军 周丽娜 张小容 彭旭 易绍萱 罗高兴 胡晓红 袁顺宗 贺伟峰 陈希炜 马兵
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 整合素β4结合蛋白 P311 激光共聚焦 基因表达 共转染 组织构建
• 年，卷（期）: 2007,（36）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7211-7214
• 页数: 4页
• 分类号: R619.6
• 字数: 4583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.36.032

摘要

目的:利用激光共聚焦显微镜共定位检测整合素β4结合蛋白与P311蛋白在细胞内的分布,进一步证实它们在细胞内产生相互作用的可能性.方法:实验于2006-03/12在解放军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成.先分别构建能在哺乳动物细胞中表达整合素β4结合蛋白的绿色荧光融合蛋白和表达P311的红色荧光融合蛋白的重组载体,经酶切鉴定正确后,利用脂质体介导法共转染人胚肾293细胞后,激光共聚焦显微镜进行共定位观察.结果:表达整合素β4结合蛋白的绿色荧光融合蛋白和表达P311的红色荧光融合蛋白的重组载体经双酶切鉴定正确,转染293细胞后,荧光显微镜下能观察到绿色和红色荧光.激光共聚焦显微镜下观察两者主要分布在293细胞的胞浆和胞核中,并且存在着共定位现象.结论:表达整合素β4结合蛋白的绿色荧光融合蛋白和表达P311的红色荧光融合蛋白的重组载体在空间分布上两者存在相互作用的物质基础.