骨髓干细胞移植后Western blot免疫印迹分析鼠抗肌萎缩蛋白表达的变化

• 作者: 于美娟 冯善伟 冯慧宇 卢锡林 姚晓黎 张成 柳太云 欧翠华
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肌营养不良蛋白 免疫印迹法 干细胞移植
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 1256-1258
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 4145字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.07.015

摘要

目的:Western blot免疫印迹分析骨髓干细胞移植后mdx鼠抗肌萎缩蛋白表达的变化.方法:实验于2004-09/12在中山大学附属第一医院神经科实验室完成.①选取7～8周龄mdx鼠25只,随机数字表法分为骨髓移植4,8,12,16周组、空白对照组,5只/组.另选取4～6周龄C57鼠20只作为供体鼠,10周龄C57鼠5只作为阳性对照组.②各组在移植前均给予照射剂量为7Gy的放疗预处理.放疗完毕后,骨髓移植4,8,12,16周组均进行尾静脉细胞移植,移植细胞数为2×107/只,0.3～0.5 mL;空白对照组、阳性对照组尾静脉输入0.3 mL磷酸盐缓冲液.③骨髓移植4,8,12,16周组分别于对应时间点处死,取其腓肠肌,制备抗肌萎缩蛋白样品,进行抗肌萎缩蛋白Western blot免疫印迹分析,以GAPDH作为内参.结果:25只7～8周龄mdx鼠、5只10周龄C57鼠全部进入结果分析.骨髓干细胞移植后抗肌萎缩蛋白Western Blot免疫印迹分析结果:空白对照组无抗肌萎缩蛋白的表达;骨髓移植4周组仅可见抗肌萎缩蛋白的徽弱表达,dystrophin/GAPDH灰度比值约为0.095±0.267;骨髓移植12周组约为0.218±0.338;随骨髓移植时间的延长抗肌萎缩蛋白表达量逐渐增加,移植后16周的表达量较移植后8周明显增加(0.393±0.385,0.173±0.284;t=6.062,P＜0.05),但仍明显低于阳性对照组1.172±0.328(t=3.14,P＜0.05).结论:骨髓干细胞移植mdx鼠后应用Western Blot免疫印迹分析可干不同时间检测到抗肌萎缩蛋白的表达,且随移植时间延长表达量增多,提示骨髓干细胞移植可长久持续参与受损骨骼肌的修复与再生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚晓黎	中山大学附属第一医院神经科	97	603	11.0	19.0
2	卢锡林	中山大学附属第一医院神经科	61	357	9.0	14.0
3	冯慧宇	中山大学附属第一医院神经科	32	193	8.0	11.0
4	冯善伟	中山大学附属第一医院神经科	41	279	8.0	14.0
5	于美娟	中山大学附属第一医院神经科	12	39	4.0	5.0
6	柳太云	中山大学附属第一医院神经科	18	183	7.0	13.0
7	欧翠华	中山大学附属第一医院神经科	2	7	2.0	2.0
8	张成		1	4	1.0	1.0