摘要:
目的:探讨骨髓基质细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的作用.方法:实验于2004-03/12在中国医科大学盛京医院动物实验室完成.①选取清洁级2~4月龄Wistar大鼠95只,5只大鼠用于骨髓基质细胞的培养,剩余90只随机数字表法分为3组:正常对照组、模型对照组、细胞移植组,30只/组.②模型对照组、细胞移植组大鼠麻醉后,以T8棘突为中心取背部后正中切口长约5 cm,显露T7-11棘突及椎板,咬除T9棘突及全椎板,在左侧建立脊髓半横断模型.③细胞移植组在造模后10 min内将制备的骨髓基质细胞悬液多点缓慢注入到脊髓半切头侧和尾侧损伤临近区域的灰白质交界处(距脊髓表面约0.7mm),3μL/点,总细胞数6×105个.模型对照组同法注射等量磷酸盐缓冲液.正常对照组不造模,于T9脊髓左半侧相同部位注射等量磷酸盐缓冲液.④各组大鼠分别于术后1 d,1,2,3,4周进行后肢运动功能评分检测,评分标准分为0~6级,分数越低表示后肢运动功能恢复越差.⑤后肢运动功能测定30 min后,进行斜板实验,检测大鼠抓握、维持姿势能力.将大鼠身体轴线与斜板纵轴垂直放置,斜板每次升高5°,以大鼠能够在斜板上维持5 s不滑下的最大角度为其功能值.结果:实验选用90只大鼠,正常对照组无脱落,造模后模型对照组死亡7只,细胞移植组死亡3只.①后肢运动功能检测结果:术后1 d,1,2,3,4周,模型对照组后肢运动功能评分随时间的延长而逐渐升高,但各时间点仍明显低于正常对照组(t=2.921~35.556,P<0.05);与模型对照组比较,术后2,3,4周细胞移植组后肢运动功能评分均明显升高[(1.84±0.32),(3.43+0.58)分;(2.43±0.62),(4.23±0.78)分;(2.83±0.69),(4.58±0.76)分;t=2.953~4.157,P<0.05].②斜板试验检测结果:术后1 d,1,2,3,4周,模型对照组斜板倾斜度数随时间的延长而逐渐增大,但各时间点仍明显低于正常对照组(t=3.284~8.381,P<0.05);与模型对照组比较,术后1,2,3,4周细胞移植组斜板倾斜度数均明显增大(t=3.275~5.260,P<0.05).结论:骨髓基质细胞移植可促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的恢复.