摘要:
目的:观察柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌组织的病理特点及胶原蛋白的表达情况.方法:实验于2004-10/2006-04在广西医科大学医学科学实验中心完成.①实验分组:选择80只Balb/c纯种雄性小鼠,鼠龄4~6周,随机分为对照组20只和模型组60只.②实验方法:模型组小鼠腹腔注射柯萨奇B3 Nancy株悬液0.1 mL,对照组腹腔注射不含病毒的Hep-2细胞冻存液0.1 mL.模型组小鼠分别于接种柯萨奇B3后第7,14,28和42天麻醉后断颈处死10只,10只,10只和9只,颈动脉采血0.8~1.0 mL,保存血清;摘取心脏,浸泡于4%多聚甲醛溶液中;对照组20只小鼠于42 d后采用上述方法处死,并留取血清及心脏.③实验评估:检测血清CVB3中和抗体滴度;心肌组织切片苏木精-伊红染色后,光镜下观察组织形态学改变;免疫组化法检测心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达情况.结果:①行为学变化及死亡情况:模型组于接种后第3天出现行为学改变,第12天后症状逐渐缓解;从第4天开始发生死亡,第7~10天为死亡高峰期,第12天后无死亡,总死亡率为35%(21/60).②血清柯萨奇B3中和抗体滴度:模型组各时间点血清柯萨奇B3中和抗体滴度均高于对照组(P<0.01),以第7天滴度为最高.③心肌组织形态学特点:接种病毒后7 d,心肌组织出现多灶性凝固性坏死,大量炎细胞浸润;28 d后,坏死灶周围的炎细胞已近消失,代之以增殖的成纤维细胞.④心肌组织病理积分:模型组各时间点心肌病理积分均明显高于对照组,其中第7天增高最为显著(P<0.05).⑤心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达:模型组各时间点心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显增加,以第42天最为显著(P<0.01);第7天和第14天小鼠心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与对照组之间无显著性差别(P>0.05),而第28天和第42天则显著高于对照组(P<0.05).结论:采用腹腔注射柯萨奇B3 Nancy株悬液的方法可以成功构建病毒性心肌炎小鼠模型.病理表现为急性期心肌细胞大量坏死,伴多种炎细胞浸润,胶原蛋白表达活跃;缓解期,成纤维细胞大量增殖,胶原蛋白表达持续增高,最终导致心肌间质重构.