全反式视黄酸对神经干细胞诱导分化和c-myc基因表达的调控

• 作者: 罗海吉 邓红 邹飞
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 神经系统 细胞分化 基因,myc 全反式视黄酸
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 2039-2042
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 5377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.11.016

摘要

目的:观察全反式视黄酸对神经干细胞的诱导分化情况,及其对c-myc基因、蛋白表达的影响.方法:实验于2005-03/06在南方医科大学高温医学研究室完成.①基础培养液:DMEM/F12中含Hepes 15 mmol/L,NaHCO32 g/L,2%B27,100 U/mL青霉素,100 U/mL链霉素.神经干细胞培养液:基础培养液+碱性成纤维细胞生长因子20μg/L.神经干细胞分化诱导培养液:基础培养液+体积分数为0.01的胎牛血清.全反式视黄酸储备液:以二甲基亚砜为溶剂,配成浓度为1.0×10-3 mol/L全反式视黄酸储备液.②出生2～3 d SD大鼠6只,麻醉后开颅取出全脑,机械分离结合无血清培养基进行鼠纹状体神经干细胞的分离培养,取生长状态良好的第3代细胞用于实验.③将神经干细胞克隆接种于12孔培养板中,全反式视黄酸组加入神经干细胞分化诱导培养液+不同浓度全反式视黄酸(0.01,0.1,1.0,10.0 μmol/L).二甲基亚砜对照组加入神经干细胞分化诱导培养液+0.01%二甲基亚砜.各组细胞培养7 d后进行免疫组织化学染色鉴定,计数神经元样细胞分化率.RT-PCR分析c-myc基因表达情况,Western blots检测c-myc蛋白的表达.结果:①神经干细胞的原代和传代培养与鉴定:来源于新生大鼠纹状体组织的原代克隆和传代克隆,呈巢蛋白抗原阳性.第3代细胞加入含不同浓度全反式视黄酸的神经干细胞分化诱导培养液,呈神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白抗原阳性.②全反式视黄酸对神经干细胞分化的影响:随着全反式视黄酸浓度(0.01,0.1,1.0,10.0 μmol/L)升高,神经元样细胞分化率逐渐增加(F=358.59,P=0.000).全反式视黄酸浓度为1.0,10.0 μmol/L时神经元样细胞分化率基本相似[(34.27±0.81)%,(35.27±0.32)%,P=0.163].③全反式视黄酸对c-myc基因及其蛋白表达的影响:随着全反式视黄酸作用时间的增加,与二甲基亚砜对照组相比,全反式视黄酸组的c-myc mRNA表达下调(F=20.891,P=0.000),c-myc蛋白表达亦下调(F=43.138,P=0.000).结论:生理浓度(1.0 μmol/L)的全反式视黄酸是诱导神经干细胞向神经元方向分化的适宜剂量.全反式视黄酸可能通过细胞周期调控因子c-myc从而影响神经干细胞的增殖分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹飞	南方医科大学公共卫生与热带医学学院高温医学研究室	110	556	13.0	18.0
2	邓红	南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系	56	198	8.0	13.0
3	罗海吉	南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系	42	374	11.0	17.0