来自基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ的麦芽糖转糖基酶的分离纯化及酶学性质研究

• 作者: 吴凌伟 夏慧玲 王水兴 郭勇 龚珩
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 麦芽糖转糖基酶 酶学性质 纯化 亲和层析
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 258-262
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2007.12.060

摘要

通过6-His的分离标签,联合采取硫酸铵沉淀,生物半透膜透析和亲和层析等方法,纯化了目标酶.通过使用凝血酶切割DsbA-MalQ融合蛋白,证明酶切后酶蛋白仍具有麦芽糖转糖基酶活性.该酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.5.当处理温度小于40℃时,酶的活力基本保持在最高活性的80%以上,相对稳定;在酶的pH耐受方面,在pH 5.5～8.0范围内较稳定.金属离子和EDTA对酶活性的影响实验表明,EDTA对酶活的影响不大,但Zn2+、Cu2+、Hg2+、Ag+对酶蛋白有较强的抑制作用,而Ca2+、Mg2+、Mn2+等对表达的酶有一定的激活作用.在37℃,pH6.5时以麦芽三糖为底物测得酶促反应的Km值为0.378mmol/L,Vmax值为1.979mmol/(L·min).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭勇	华南理工大学生物科学与工程学院	195	2299	24.0	36.0
2	夏慧玲	南昌大学中德联合研究院	16	98	6.0	8.0
3	王水兴	南昌大学中德联合研究院	29	149	6.0	10.0
4	吴凌伟	南昌大学中德联合研究院	13	59	5.0	6.0
5	龚珩	九江学院医学院	2	8	2.0	2.0