脂肪干细胞在体外特定培养液中向软骨细胞表型的分化

• 作者: 徐亮 杨述华 田宏涛
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 转化生长因子 软骨细胞 细胞分化 脂肪组织/细胞学
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 组织工程化骨及软骨构建
• 页码范围: 1805-1807
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.10.002

摘要

目的:应用转化生长因子β1,体外诱导脂肪干细胞向成软骨细胞表型分化,探讨其作为组织工程化软骨种子细胞的可行性.方法:实验于2005-04/2006-06在华中科技大学同济医学院公卫实验室完成.①取大鼠腹股沟处脂肪,酶消化法分离、培养脂肪干细胞,体外传代培养.②取第3代细胞通过转化生长因子β1、地塞米松和维生素C诱导脂肪干细胞向软骨细胞分化.③诱导后14 d观察细胞形态变化,进行阿辛蓝染色检测软骨基质的分泌、免疫组织化学检测细胞Ⅱ型胶原的表达,采用Western-blot和反转录-聚合酶链反应检测诱导前后成软骨相关的Sox9,蛋白聚糖与Ⅱ型胶原的表达.结果:①细胞接种的最初几日,细胞呈圆形,1周后贴壁细胞呈长梭形,体积增大;14 d后贴壁生长细胞基本长满单层,中心细胞排列紧密,形态与骨髓间充质干细胞相似.诱导培养后,细胞形态逐渐由梭型向多角形、多边形转变.诱导14 d后多数细胞呈平坦的多边角形状细胞;其夹杂多角突起状或多角纺锤状细胞.②诱导后阿辛蓝染色示糖胺聚糖均匀分布于基质中.③免疫组织化学染色示基质中Ⅱ型胶原表达阳性.④反转录-聚合酶链反应检测成软骨相关的Sox9、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达阳性.⑤Western-blot印迹检测细胞诱导后Ⅱ型胶原蛋白表达阳性.结论:脂肪干细胞在特定培养液的诱导下可向成软骨细胞表型分化,并能分泌软骨细胞特异性基质,有望成为软骨组织工程新的细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨述华	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	562	4404	28.0	40.0
2	徐亮	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	16	82	6.0	8.0
3	田宏涛	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	1	11	1.0	1.0