单管巢式PCR结合熔解曲线分析检测乙肝病毒YMDD变异

• 作者: 戴利亚 杨建荣 陈占国
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 聚合酶链反应 熔解曲线分析 YMDD 变异
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 195-198
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 4809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2007.02.020

摘要

目的:在建立针对乙肝病毒(HBV)聚合酶基因的单管巢式PCR方法的基础上,结合熔解曲线分析,提高HBV YMDD变异检测的灵敏度.方法:针对HBV聚合酶基因段设计两对熔解温度(Tm)差异较大的内、外引物,在一个封闭反应体系中进行二次扩增并结合熔解曲线分析法检测HBV YMDD变异.结果分别与单纯PCR结合熔解曲线分析和测序法进行比较,并对107例未经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBV YMDD的自发变异进行分析.结果:建立在单管巢式PCR方法上的熔解曲线分析检测HBV YMDD变异灵敏度要高于单纯PCR结合熔解曲线分析的方法(P＜0.001),与直接测序法的符合率为81.3%.在114例CHB标本中YMDD及其变异检出率为95.6%.用本方法在107例未经拉米夫定治疗的CHB病人中YMDD自发变异检出率为31.8%.结论:单管巢式PCR结合熔解曲线分析法提高了YMDD变异检测的灵敏度,而且是一种简便、特异性较好的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈占国	温州医学院附属第一医院实验诊断中心	35	276	9.0	15.0
2	杨建荣	温州医学院附属第一医院实验诊断中心	38	224	8.0	12.0
3	戴利亚	温州医学院附属第一医院实验诊断中心	2	9	1.0	2.0