摘要:
目的:观察染料木黄酮对成骨细胞活性的影响及其相关机制.方法:实验于2001-05/2003-05在卫生学环境医学研究所实验室完成.①成骨细胞培养:无菌条件下分离出生3 d的乳鼠颅盖骨,剪碎,加入胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶,用含体积分数为0.1的胎牛血清的F-12培养基重悬,调整细胞浓度后接种于25 mL细胞培养瓶,Ⅱ代细胞用于实验.②实验方法:实验分为染料木黄酮组、雌激素组和对照组(吐温20),染料木黄酮剂量分别为10-5,10-6、10-7mol/L,雌激素剂量分别为10-9,10-10mol/L,培养48,72 h后,应用MTT和3H-TdR掺入实验观察不同剂量的染料木黄酮和雌激素对成骨细胞活性影响,免疫组化的方法测定白细胞介素6表达.结果:①A570nm值:培养48 h,染料木黄酮10-5,10-6,10-7 mol/L组分别比对照组增加105%,136%和143%;10-9,10-10mol/L雌激素组分别比对照组增加84%和100%;培养72 h,染料木黄酮3个剂量组分别比对照组增加93%,113%和146%,各剂量组与对照组相比均有显著性差异(P<0.05).②3H-TdR掺入量:10-5,10-6,10-7mol/L染料木黄酮组分别比对照组增加0.47,11.29,6.45倍;10-9和10-10mol/L雌激素组增加15.4倍和16.5倍(P<0.05).③白细胞介素6表达:各组成骨细胞周围均有较强的呈棕色的阳性颗粒,但染料木黄酮组组与对照组相比无明显差别.结论:①10-5~10-7 mol/L染料木黄酮和雌激素一样可促进成骨细胞增殖和DNA合成.②染料木黄酮不是通过促进白细胞介素6表达来促进成骨细胞增殖与分化.