小干扰RNA抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因的表达

• 作者: 孟和 崔芳岩 张小勤 彭映基 李峰 潘玉春 赵艳
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 BACE1 基因 神经元
• 年，卷（期）: 2007,（19）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3771-3774
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 4589字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.19.032

摘要

目的:分析小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因(Beta-site APP cleaving enzyme protein,BACE1)的表达情况.方法:实验于2004-12/2006-06在中山大学中山医学院和上海交通大学农业与生物学院完成.①用脂质体将EGFP基因表达载体pEGFP-C1 Vector和体外转录合成的针对EGFP基因的小干扰RNA(siEGFP)分别或同时转染neuro-2a细胞,在倒置荧光显微镜下计算EGFP在neuro-2a细胞中的表达率.②将体外转录合成的siBACE1-1,siBACE1-2,siBACE1-3转染neuro-2a细胞,干扰24,48,72 h后分别用Real time RT-PCR定量分析siBACE1对内源BACE1基因表达的抑制率和干扰的时效性.结果:①外源EGFP基因转染neuro-2a细胞后,43%neuro-2a细胞高表达EGFP蛋白.通过转染siEGFP则可有效抑制EGFP基因表达.②3个干扰位点的siBACE1对BACE1基因表达有不同的抑制效率,siBACE1-3使BACE1 mRNA表达水平下降60%,siBACE1-1为13%,siBACE1-2对BACE1 mRNA无明显的抑制作用.③siBACE1抑制内源BACE1基因的表达与干扰时间相关,siBACE1干扰24 h、48 h后BACE1 mRNA的表达与正常组无明显差异(P＞0.05),但干扰72 h后,siBACE1-3和siBACE1-1均使BACE1 mRNA表达量下降.结论:体外转录合成的siBACE1能有效抑制neuro-2a细胞内源BACE1基因表达,其抑制率与BACE1基因的干扰位点和干扰时间相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭映基	中山大学中山医学院解剖学教研室	20	107	6.0	9.0
2	潘玉春	上海交通大学农业与生物学院	84	713	14.0	23.0
3	孟和	上海交通大学农业与生物学院	67	735	16.0	24.0
4	张小勤	中山大学中山医学院解剖学教研室	9	16	3.0	3.0
5	李峰	中山大学中山医学院解剖学教研室	35	272	9.0	15.0
6	赵艳	中山大学中山医学院解剖学教研室	3	0	0.0	0.0
7	崔芳岩	上海交通大学农业与生物学院	2	0	0.0	0.0