AdLacZ基因修饰山羊耳软骨细胞复合F127构建组织工程化软骨

• 作者: 常庆 张秀丽 蒋欣泉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞,组织工程,基因治疗 组织构建
• 年，卷（期）: 2007,（32）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 6326-6329
• 页数: 4页
• 分类号: R329.471
• 字数: 4413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.32.002

摘要

目的:应用AdLacZ基因修饰体外培养的山羊耳软骨细胞,并与Pluronic F127支架材料复合,观察裸鼠皮下软骨形成的情况,为进一步应用软骨分化因子基因修饰重建软骨的研究提供参数.方法:实验于2004-11/2006-12在上海交通大学医学院附属第九人民医院完成.①实验材料:取健康雄性山羊,体质量26～30 kg.6周龄BALB/c裸鼠24只,体质量20 g.体外培养山羊耳软骨细胞,转染AdLacZ基因,检测基因转染效率.②实验方法:将基因修饰的细胞与可吸收生物材料Pluronic F127混合形成细胞-生物材料复合物,并注射到6只裸鼠皮下,每只在其背部皮下分别接种2个点,分别在术后2,4周取材,每个时间点有标本6例.另取裸鼠18只,同样设计,分别以未转基因的软骨细胞-材料复合物、单独注射的软骨细胞、或单独注射的F127支架作为对照组,每组6只.③实验评估:标本行苏木精-伊红染色、阿利新蓝染色,并对4周标本行X-gal染色,Ⅱ型胶原免疫组织化学检测.结果:纳入BALB/c裸鼠24只,均进入结果分析.①50 pfu/细胞可以获得80%的转染效率.②2周时细胞-材料复合物形成了不成熟的软骨样组织,苏木精-伊红染色显示外周呈纤维样组织包裹,中部大部分为不成熟的软骨细胞;4周实验组中央部位出现少量稍成熟的软骨,阿利新蓝染色显示该部位为深蓝色的巢状软骨,部分细胞有Ⅱ型胶原阳性表达.冰冻切片X-gal染色提示细胞来自于植入的软骨-材料复合物.对照组未转基因的软骨细胞-材料复合物,其组织学及Ⅱ型胶原免疫组织化学表现与实验组没有明显差别,而X-gal染色为阴性.单独注射软骨细胞或单独注射F127支架,在4周内则均未见到软骨形成.结论:腺病毒载体可向软骨细胞高效转移目的基因,F127支架材料是软骨再生较为理想的支架材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张秀丽		22	114	7.0	8.0
2	常庆		6	93	4.0	6.0
4	蒋欣泉		9	39	4.0	6.0