摘要:
背景:理想的骨细胞支架材料除具有良好的生物相容性外,还能促进细胞的增殖和分化,诱导骨组织再生,各种细胞支架材料单独使用时的成骨能力是有限的.目的:观察复合有骨形态发生蛋白的珊瑚羟基磷灰石与成骨细胞的生物相容性.设计:对比观察.材料:珊瑚羟基磷灰石/骨形态发生蛋白、珊瑚羟基磷灰石,将其分别切割成4 mm×4 mm×3 mm和10 mm×10 mm×3 mm大小块状物,高压灭菌后,完全培养基浸泡4 d后备用.方法:实验于2005-03/08在广州军区广州总医院中心实验室完成.①取新西兰大白兔骨髓成骨细胞培养.②将成骨细胞分别和珊瑚羟基磷灰石/骨形态发生蛋白(复合珊瑚羟基磷灰石组)、珊瑚羟基磷灰石(单纯珊瑚羟基磷灰石组)混合培养,并设空白对照.③混合培养后2,4,6,8 d分别检测细胞增殖指数和碱性磷酸酶活性.主要观察指标:①成骨细胞相差显微镜观察结果.②复合珊瑚羟基磷灰石材料扫描电镜观察结果.③各组细胞碱性磷酸酶活性测定.④各组细胞增殖指数测定.结果:①成骨细胞相差显微镜观察结果:细胞呈梭形、扁圆形及多角形外观,有数量不等、长短及粗细不一的突起,细胞通过突起相互间接触.②复合珊瑚羟基磷灰石材料扫描电镜观察结果:材料表面呈颗粒状,具有微孔.成骨细胞在材料表面贴壁生长,初为单层,随着细胞的进一步分化、增殖,细胞开始叠层生长,细胞周围出现高密度颗粒,排列方式绝大多数呈一定取向,随着钙盐结晶的增多,最终形成骨结节.细胞被包埋在基质中.③各组细胞碱性磷酸酶活性测定显示:混合培养后2,4,6,8 d复合珊瑚羟基磷灰石组的碱性磷酸酶活性(A值)明显高于单纯珊瑚羟基磷灰石组和对照组(4 d:101.6±7.7,93.7±6.8,94.4±5.0;8 d:120.1±8.2,108.3±8.8,110.4±7.5;P<0.01或0.05).单纯珊瑚羟基磷灰石组与对照组比较差异不明显.④各组细胞增殖指数测定显示:随着时间的延长,两组的细胞增殖指数均有所增加,但相互间差异不明显.结论:复合珊瑚羟基磷灰石内部呈珊瑚状,微孔数量多,细胞在其表面附着良好,具有很好的生物相容性,另外由于其复合了骨形态蛋白可以增强细胞碱性磷酸酶活性,故有一定的骨诱导作用.