腺病毒重组绿色荧光蛋白转染脂肪组织来源干细胞的特点

• 作者: 朱茗 杨波 高建华 鲁峰
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪组织来源干细胞 重组腺病毒 转染 感染复数 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（33）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 6557-6560
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4770字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.33.018

摘要

目的:体外基因转染成人脂肪组织来源的干细胞后,观察腺病毒载体能否有效地转染及对细胞的影响.实验应用腺病毒增强型绿色荧光蛋白进行体外基因转染以验证基因修饰效果.方法:实验于2006-10/2007-02在南方医科大学生物技术工程研究所实验室完成.实验对象:脂肪组织取自南方医科大学附属医院整形科手术室5例成年女性腹部吸脂术患者,排除了冠心病、高血压及糖尿病等.手术前均与患者本人谈话并征得其同意,获取脂肪组织进行实验,并经医院伦理委员会批准.实验方法:分离人脂肪组织,进行原代和传代培养.取第4代脂肪组织来源干细胞进行流式细胞术表型鉴定,并将0,10,20,30,50,100感染复数值的腺病毒重组增强型绿色荧光蛋白,通过活力和增殖实验进行体外转染,观察其对脂肪组织来源干细胞的影响.结果:5份标本均成功培养出脂肪组织来源干细胞,生长良好,均成功进行了腺病毒重组增强型绿色荧光蛋白基因转染.①原代细胞培养48 h后可见细胞贴壁,13 d后可见细胞铺满瓶底80%细胞绝大多数呈梭形.1∶2传代后细胞增殖速度明显加快,3 d后细胞即已长满培养瓶底,即可传代.第4代的脂肪组织来源干细胞表型,呈CD29+,CD34,CD44+,CD106-,CD133-和HLA-DR-.②腺病毒重组增强型绿色荧光蛋白转染24 h可见绿色荧光,5 d荧光表达强度最强,脂肪组织来源干细胞细胞传代培养后仍有强荧光表达.③转染组和未转染组细胞培养1,3,5,7,9,11 d时细胞活力、增殖分化均无统计学差异.结论:腺病毒重组增强型绿色荧光蛋白可成功进入脂肪组织来源干细胞,感染复数值为50时较为理想.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高建华	南方医科大学附属南方医院整形科	141	942	15.0	21.0
2	鲁峰	南方医科大学附属南方医院整形科	105	653	12.0	19.0
3	朱茗	南方医科大学附属南方医院整形科	10	117	5.0	10.0
4	杨波	南方医科大学附属南方医院整形科	25	182	7.0	13.0