外周血DNA提取方法及其特点

• 作者: 史英钦 张冬会 张文杰
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: DNA/分离和提纯 氯仿 碘化钾
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 经验交流
• 页码范围: 2167
• 页数: 1页
• 分类号: R3
• 字数: 1701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.11.054

摘要

为适应临床检验工作的需要,介绍几种外周血提取DNA的常用方法及其各自特点.全血酸性柠檬酸葡萄糖溶液B抗凝后,进行有核细胞分离,离心去上清,得到白细胞沉淀物,用于外周血DNA的提取.经典酚/氯仿提取法,可有效去除蛋白质及色素等物质,使DNA达到较高的纯度,但自行配制饱和酚费时耗力,而在市场上购买的饱和酚大多达不到pH 8.0,根据相似相溶原理,酸性酚会使DNA溶于其中,降低提取量,此外沉淀DNA时需要一价阳离子的参与.盐析法提取DNA可不用饱和酚,费用低,且沉淀DNA时不需加一价阳离子,目前多数实验均采用此法.碘化钾法提取DNA步骤少且时间短,DNA获得率较高,所用试剂价格便宜、性质稳定,不需特殊实验条件及蛋白酶K.煮沸裂解法提取DNA,可导致上清液中模板核酸量减少、抑制扩增效率,实验室除做一些感染性的指标外很少采用此方法.就实验本身而言,需根据实际情况合理选择提取方法,以节省时间和经费,顺利完成实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张文杰	河北省人民医院临床医学研究中心	31	181	9.0	12.0
2	史英钦	河北省人民医院临床医学研究中心	37	108	6.0	9.0
3	张冬会	河北省人民医院临床医学研究中心	34	83	6.0	7.0