摘要:
目的:利用细胞生物学和工程学原理在体外重建角膜基质结构,分析影响角膜胶原收缩的因素.方法:实验于2004-03/2005-02在解放军总医院眼科实验室完成.①选择1.0~2.0 kg大耳白兔,取角膜,分离培养上皮细胞和基质细胞并传代.②以鼠尾为原料提取Ⅰ型胶原溶液.③取传代的角膜基质细胞密度为0,5×104,10×104,50×104四组混合于提取的Ⅰ型胶原溶液中,形成角膜基质胶原块,观察角膜基质细胞浓度对角膜基质胶原块收缩的影响.④取培养传代的角膜基质细胞,混合于0.55,1.1,1.65,3.3 g/L 4组质量浓度Ⅰ型胶原溶液中,形成角膜基质凝胶块,在培养皿中培养,观察不同胶原质量浓度对凝胶块收缩的影响.⑤培养角膜上皮细胞接种于基质凝胶上,气-液界面培养,观察角膜上皮和基质细胞对角膜基质凝胶块收缩的影响.结果:①基质细胞对胶原凝胶收缩影响明显(Q=0.016,P<0.05),上皮细胞对胶原凝胶的收缩无显著影响(Q=1.000,P>0.05).②不同细胞密度的胶原面积差异有显著性(F=23.15,P=0.000 1).4组的胶原面积变化规律相同,均随时间的增加而减少.③不同胶原质量浓度的胶原面积差异有显著性(F=24.17,P=0.000 1);4组的胶原面积变化规律相同,均随时间增加而减少.结论:角膜基质细胞是引起胶原收缩的决定因素,角膜上皮对胶原的收缩无明显的影响.胶原的质量浓度和基质细胞数对胶原收缩均有影响,即随胶原质量浓度增大或角膜基质细胞数增多,胶原凝胶收缩能力增加.