摘要:
背景:目前复合材料已成为骨移植材料研究的热点,多孔聚乳酸/骨基质明胶复合活性材料的应用有待研究.目的:采用超临界二氧化碳合成法制备多孔聚乳酸/骨基质明胶复合活性材料,体外评价其骨形成能力.设计:观察对比实验.单位:南方医科大学组织工程研究中心,中国辐射防护研究院生物材料制药技术研究所.材料:小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞从日本RIKEN细胞库获得,聚乳酸由暨南大学提供.碱性磷酸酶检测试剂为南京建成生物工程研究所产品.小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞在含100 g/L胎牛血清(四季青)、100 mg/L青霉素和100 U/L链霉素的DMEM培养基(Gibco,美国)培养,用0.25%胰酶(Gibco,美国)传代.方法:实验于2005-10/2006-07在南方医科大学组织工程研究中心广东省重点实验室完成.采用超临界二氧化碳法制备多孔聚乳酸/骨基质明胶复合材料,并通过大体及扫描电镜观察复合情况.在体外将聚乳酸、聚乳酸/骨基质明胶与MC3T3-E1小鼠成骨前体细胞共培养,分别为聚乳酸组及聚乳酸/骨基质明胶组,正常培养基作为对照组,数码相机拍摄每组培养孔图像,图像处理与分析软件测定被染色面积占培养孔面积百分比,即为钙化结节面积百分比.采用细胞超声裂解法检测各组细胞内钙含量及碱性磷酸酶活性.主要观察指标:①聚乳酸/骨基质明胶大体及扫描电镜观察结果;②钙化面积的定量测定.③钙含量及碱性磷酸酶活性测定.结果:①聚乳酸/骨基质明胶大体及扫描电镜观察结果:复合材料骨基质明胶与聚乳酸混合均匀,材料孔隙分布均匀,孔隙大小在50~150 μm之间,孔洞联通性好.在这些大孔隙的壁上,仍有大量5~10 μm的孔隙.②钙化结节面积测定结果:聚乳酸/骨基质明胶复合材料组、聚乳酸组、空白对照组钙化结节形成面积百分比分别为(42.98±4.44)%,(9.55±1.94)%,(0.86±0.41)%,组间比较差异均有统计学意义(P<0.01).③钙含量及碱性磷酸酶测定结果:聚乳酸/骨基质明胶复合材料组、聚乳酸组和空白对照组的碱性磷酸酶活性分别为(5 427.58±1 173.57),(1 060.54±500.27),(40.01±24.50)nkat/g,组间比较均有统计学意义(P<0.05~0.01);聚乳酸/骨基质明胶复合材料组钙含量为(3 51±1.64)mmol/g,高于聚乳酸组和空白对照组[(1.04±0.21),(0.70±0.24)mmol/g,P<0.01].结论:采用超临界二氧化碳合成法制备的聚乳酸/骨基质明胶多孔复合支架材料具有良好的骨诱导活性,有可能作为一种有前景的骨植入材料及骨组织工程支架材料.