人血小板源性生长因子A基因发夹结构小干扰RNA真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 于雷 冯相伟 吴雅臻 孙蕾
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 shRNA 血小板源性生长因子A 质粒
• 年，卷（期）: 2007,（46）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 9289-9292
• 页数: 4页
• 分类号: R331.1
• 字数: 4660字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.46.022

摘要

目的:血小板源性生长因子对诱发视网膜色素上皮细胞移行、最终导致增生性玻璃体视网膜病变起到了重要作用.构建人血小板源性生长因子A具有发夹结构小干扰RNA(shRNA)表达质粒,以观察其对人血小板源性生长因子A基因表达的沉默效果.方法:实验于2007-04/2007-07在吉林大学第一临床医院传染科研究室完成.根据血小板源性生长因子A基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pGPU6/GFP/Neo中,构建重组质粒,同时设计构建分别针对人GAPDH干扰质粒作为阳性对照,不针对任何特异基因的质粒作为阴性对照.通过酶切鉴定和测序验证阳性克隆.结果:经重组质粒筛选,重组质粒测序鉴定与设计的shRNA转录模板序列相同,均证实重组质粒构建成功.结论:利用RNA干扰技术路线可成功构建靶向人血小板源性生长因子A的发夹结构小干扰RNA表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴雅臻	吉林大学第二临床医院眼科	73	208	7.0	9.0
2	孙蕾	吉林大学第二临床医院眼科	21	174	6.0	13.0
3	于雷	吉林大学第一临床医院传染科	67	224	8.0	12.0
4	冯相伟	吉林大学第一临床医院传染科	8	28	2.0	5.0