人脂肪干细胞体外培养特性及成脂成软骨分化

• 作者: 刘浩宇 尹维田 郭宝锋 魏壮
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 组织工程 干细胞 软骨
• 年，卷（期）: 2007,（33）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 6625-6628
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.33.005

摘要

目的:观察人脂肪组织间充质干细胞体外分离培养及成脂、成软骨诱导分化的生物学性状,探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可行性.方法:实验于2006-08/2007-03在吉林大学中日联谊医院前列腺疾病防治研究中心完成主要工作.实验方法:①人脂肪组织来源于健康成年女性腹部吸脂术,酶消化法分离出脂肪间充质干细胞,接种于含体积分数为0.10胎牛血清的高糖DMEM培养基进行原代培养.②取第3代脂肪间充质干细胞,采用细胞计数法测定细胞生长曲线,流式细胞仪测定CD13、CD34抗原的表达,免疫荧光法测定CD34抗原的表达.③取第3代脂肪间充质干细胞,用含体积分数为0.10胎牛血清、0.5 mmol/L IBMX、1 μmol/L地塞米松、10 μmol/L胰岛素的成脂诱导培养基和含体积分数为0.01胎牛血清、10 μg/L转化生长因子β1、50 nmol/L抗坏血酸、6.25 mg/L胰岛素的成软骨诱导培养基分别诱导分化.④每天用倒置显微镜观察细胞形态及增殖变化,油红"O"、AB-PSA染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色检测成脂、成软骨分化情况.结果:①体外培养的脂肪间充质干细胞呈扁平的长梭形,细胞形态均一,传代稳定.间质细胞相关标志CD13和干细胞相关标志CD34表达阳性.②定向诱导后表现出脂肪细胞和软骨细胞特性.经成脂诱导,细胞内出现空泡,油红"O"染色呈红色;经成软骨染色,AB-PSA染色呈紫红色,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色胞浆呈棕黄色.结论:脂肪干细胞能向软骨细胞方向诱导分化,可作为软骨组织工程种子细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘浩宇	吉林大学中日联谊医院手外科	46	232	8.0	13.0
2	魏壮	吉林大学中日联谊医院手外科	64	320	10.0	15.0
3	尹维田	吉林大学中日联谊医院手外科	84	464	11.0	16.0
4	郭宝锋	吉林大学中日联谊医院手外科	9	32	4.0	5.0