摘要:
背景:采用不同方法和生物材料应用于动物实验及临床实践以预防硬膜外瘢痕形成.在材料学方面采用较多的为可生物降解以及黏性半流体凝胶类.丹参及卡波姆均是已被临床证实为安全有效的药物及凝胶制剂.目的:观察丹参卡波姆凝胶预防椎板切除术后硬膜外粘连的效果.设计:完全随机分组设计,对照实验.单位:中国广东省深圳市人民医院(暨南大学第二临床学院)骨科.材料:选用健康纯种新西兰大白兔36只,雌雄不拘,兔龄2-3岁.将动物按随机摸球法分为4组,每组9只:空白对照组、凝胶对照组、透明质酸钠组、丹参凝胶组.卡波姆934粉末(上海人民制药厂,批号20000510);透明质酸钠(山东博士伦福瑞达制药公司,国药准字H10960136 2 mL(20 mq)).方法:实验于2002-04/2003-08在深圳市人民医院动物实验室完成.①制备丹参卡波姆凝胶:丹参制成丹参浸膏粉备用.卡波姆934粉末加水溶胀过夜,依次加入丙二醇和甘油混匀,滴加三乙醇胺后,再加入丹参浸膏粉2 g加纯化水搅匀至100.0 g,制成丹参卡波姆凝胶.②麻醉动物后,分别于L3,L6水平完整切除椎板(保留上下关节突),制成10 mm×5 mm大小缺损,暴露硬膜.凝胶对照组、透明质酸钠组、丹参凝胶组动物的两处椎板缺损处分别加入1 mL 卡波姆凝胶、1 mL 20 g/L 透明质酸钠、1 mL丹参卡波姆凝胶;空白对照组则不加任何试剂.③大体标本:分别于术后4,6,8周处死动物.每组每次处死3只动物.完整取出手术节段(L3,L6)脊柱,每次共24个标本.标本苏木精-伊红染色,光镜下观察.电镜标本:每组各取术后4周标本1个,利用日立H-600型透射电镜观察.④术后8周对4组24个标本行大体瘢痕组织与硬膜的粘连紧密度等级评定:共分4级;0级:硬膜囊与瘢痕组织无明显粘连;Ⅲ级:粘连广泛、致密,硬膜囊与瘢痕组织无法钝性分离,锐性分离后的硬膜囊无法保持完整.将每一脊柱节段标本均匀切成4段,每一段均制成切片染色后置于Tiger2000型图像分析仪上进行硬膜外瘢痕厚度测定.⑤大体瘢痕粘连紧密度等级评定进行秩和检验,硬膜外瘢痕厚度进行析因实验设计资料的方差分析、两两比较.主要观察指标:①各组术后8周脊柱节段标本大体瘢痕粘连紧密度等级评定结果及术后4,6,8周硬膜外瘢痕厚度比较.②各组术后大体观察、组织学检查以及超微结构检查结果.结果:兔36只均进入结果分析.①大体观察、组织病理学检查结果:术后各时间点空白对照组硬膜外均形成致密粘连;凝胶对照组和透明质酸钠组部分粘连;丹参凝胶组无明显粘连.②定量分析结果:术后8周空白对照组、凝胶对照组、透明质酸钠组大体眼瘢痕粘连度评级较低的只数明显少于丹参凝胶组(W=45~52,P<0.05~0.01).术后4,6,8周丹参凝胶组瘢痕厚度均明显小于其他3组(F=128.657,152.246,80.891,P<0.01).③透射电镜检查结果:术后4周时空白对照组、凝胶对照组、透明质酸钠组均可见增殖活跃的成纤维细胞,丹参凝胶组成纤维细胞增殖不活跃.结论:①丹参有抑制成纤维细胞增殖、分化与合成分泌胶原的功能,从而抑制硬膜外瘢痕粘连形成.②透明质酸钠过早被机体吸收,从而使其防粘连的作用减少;而卡波姆凝胶存留时间较长,在创伤修复全过程中起到了抑制和阻隔粘连形成的作用.