链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其分子机制

• 作者: 平国玲 张力平 朱俊平 李卫红 李彦芹 王艳 范东瀛 郑群
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 链球菌 细胞凋亡 人肝癌Bel-7402细胞 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2007,（43）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 8733-8736
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4884字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.43.041

摘要

目的:从分子水平观察链球菌蛋白质对人肝癌Bel-7402细胞的生长增殖的抑制作用.方法:实验于2005-10/2006-11在首都医科大学病原生物学系实验室完成.①链球菌32080株购自中国医学细菌保藏管理中心,人肝癌Bel-7402细胞株由首都医科大学细胞生物学系惠赠.②常规培养链球菌并按照Winters方法提取细菌蛋白.③用0.10,20.100 mg/L细菌蛋白作用于单层培养的Bel-7402细胞24,48,72 h,采用MTT法检测链球菌蛋白对细胞的增殖抑制作用.④Bel-7402细胞经10 mg/L或50 mg/L细菌蛋白分别作用48,72 h后,流式细胞术检测细菌蛋白对癌细胞生长周期时相分布.⑤Bel-7402细胞经50 mg/L的细菌蛋白分别作用24,48,72 h后,Annexin-v PI双染法检测Bel-7402细胞凋亡率.⑥用50 mg/L的链球菌蛋白分别作用于Bel-7402细胞0,24,48,72 h后,Western Blot检测链球菌蛋白对Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的影响.结果:①链球菌蛋白对Bel-7402细胞的抑制作用:链球菌蛋白能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖,100 mg/L细菌蛋白作用于细胞24,48,72 h的抑制率分别为15.6%,35.6%,50%,呈剂量和时间依赖关系.②细菌蛋白对肝癌细胞生长周期时相分布及细胞凋亡率的影响:经链球菌蛋白(10,50 mg/L)作用后,G2/M期Bel-7402细胞比率较正常对照组增加,差异有显著性(P＜0.05);流式细胞术检测显示,经50 mg/L链球菌蛋白作用后,实验组Bel-7402细胞凋亡率明显高于对照组细胞(P＜0.01).③Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的变化:Bel-7402细胞经50mg/L链球菌蛋白分别作用24,48,72 h后,细胞色素C的释放逐渐增多,Procaspase-3及Bcl-2蛋白水平降低.结论:链球菌32080株蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用存在着剂量和时间依赖性,并能将细胞的生长周期阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡,影响Bcl-2,procaspase-3和细胞色素C等重要的凋亡相关蛋白水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李彦芹	首都医科大学病原生物学系	2	6	1.0	2.0
2	王艳	首都医科大学病原生物学系	116	603	12.0	18.0
3	平国玲	首都医科大学病原生物学系	24	86	6.0	8.0
4	张力平	首都医科大学病原生物学系	42	140	6.0	10.0
5	李卫红	首都医科大学细胞生物学系	74	368	10.0	15.0
6	范东瀛	首都医科大学病原生物学系	19	25	3.0	3.0
7	郑群	首都医科大学病原生物学系	30	143	7.0	11.0
8	朱俊平	首都医科大学病原生物学系	2	5	1.0	2.0