肝脏缺血预处理过程中蛋白激酶C活性的变化

• 作者: 孔凡东 张翌 李爱辉 潘明新 王海澜 高毅
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肝脏缺血预处理 蛋白激酶C 信号转导 大鼠
• 年，卷（期）: 2007,（25）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 4913-4915
• 页数: 3页
• 分类号: R657.3
• 字数: 4397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.25.042

摘要

目的:观察在肝脏缺血预处理过程中蛋白激酶C的活性改变及细胞内信号转导机制.方法:实验于2004-03/2005-03在南方医科大学珠江医院中心实验室完成.实验分组:36只大鼠随机分成6组,每组6只.①假手术组.②缺血再灌注组.③缺血预处理组.④缺血再灌注+豆蔻酸佛波酰乙脂组.⑤缺血预处理+白屈菜季铵碱组.⑥缺血预处理+PD98059组.实验干预:①假手术组仅分离肝十二指肠韧带,不阻断肝门,不进行其他干预处理.②缺血再灌注组在第一肝门用小血管夹阻断尾状叶及左肝叶血流40 min松开血管夹肝脏再灌注3 h,再灌注开始后关腹.③缺血预处理组先行3个循环的缺血预处理,阻断第一肝门10 min,开放再灌注10 min为1个循环,随后操作同缺血再灌注组.④缺血再灌注+豆蔻酸佛波酰乙脂组:按4 μg/kg共0.5 mL蛋白激酶C激动剂豆蔻酸佛波酰乙脂溶液,经静脉通道缓慢推注,推注10 min,推注后等待10 min,余处理同缺血再灌注组.⑤缺血预处理+白屈菜季铵碱组:按5 mg/kg共0.5 mL蛋白激酶C抑制剂白屈菜季铵碱溶液,同样用10 min经静脉通道缓慢推注,推注后等待10 min,其余处理同缺血预处理组.⑥缺血预处理+PD98059组:按5 mg/kg共0.5 mL丝裂原激活的蛋白激酶抑制剂PD98058溶液,同上速度缓慢静脉推注,推注后等待10 min,余处理同缺血预处理组.实验评估:①在ECHNICONRA-1000全自动生化分析仪上采用速率法检测血清谷草转氨酶和血清谷丙转氨酶活性.②按蛋白激酶C活性测定试剂盒操作步骤检测肝组织蛋白激酶C活力.③Western blot免疫印迹法检测肝组织磷酸P44/42 MAPKs活性.结果:36只大鼠均进入结果分析,中途无脱落和死亡.①血清谷草转氨酶和血清谷丙转氨酶活性:缺血预处理组低于缺血再灌注组(P＜0.01).缺血预处理+白屈菜季铵碱组、缺血预处理+PD98059组显著高于缺血预处理组(P＜0.01).缺血再灌注+豆蔻酸佛波酰乙脂组显著低于缺血再灌注组(P＜0.01).②蛋白激酶C活力:缺血预处理组高于缺血再灌注组[(1 877.2±81.0),(713.1±37.0)pkat/g,P＜0.01];缺血再灌注+豆蔻酸佛波酰乙脂组亦显著高于缺血再灌注组[(2 758.4±454.3),(713.1±37.0)pkat/g,P＜0.01];缺血预处理+白屈菜季铵碱组明显低于缺血预处理组[(567.9±46.2),(1 877.2±81.0)pkat/g,P＜0.01].③磷酸P44/42 MAPKs活性:与假手术组比较,其在缺血再灌注组的表达量轻度升高;缺血预处理组较缺血再灌注组升高显著;缺血预处理+白屈菜季铵碱组较缺血预处理组明显降低,缺血预处理+PD98059组表达量下降更为显著;缺血再灌注+豆蔻酸佛波酰乙脂组表达量较缺血再灌注组明显升高.结论:缺血预处理保护效应中,蛋白激酶C对P44/42 MAPKs信号通路的激活是细胞保护效应的一个重要环节.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘明新	南方医科大学珠江医院普通外科	85	462	13.0	17.0
2	高毅	南方医科大学珠江医院普通外科	139	641	14.0	18.0
3	张翌	南方医科大学珠江医院普通外科	9	15	2.0	3.0
4	李爱辉	南方医科大学珠江医院普通外科	8	16	2.0	3.0
5	孔凡东	南方医科大学珠江医院普通外科	26	105	6.0	8.0
6	王海澜	南方医科大学珠江医院普通外科	5	21	3.0	4.0