关节软骨脱细胞支架材料的制备

• 作者: 夏亚一 张海鸿 武天佑 汪静 王栓科 王翠芳 赵斌 赵琳
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 支架材料 脱细胞 关节 软骨 制备
• 年，卷（期）: 2007,（18）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 3601-3603
• 页数: 3页
• 分类号: R318.08
• 字数: 4462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.18.038

摘要

目的:探讨脱细胞关节软骨支架材料的制备方法,制备软骨理想的组织工程支架材料.方法:实验于2005-12/2006-08在兰州大学第二医院骨科研究所实验室完成.实验方法:利用冷冻干燥、化学去污剂等方法制备脱细胞的兔关节软骨.在无菌状态下取青紫蓝兔的新鲜兔关节软骨,剪成3.5 mm×3.5 mm,厚度0.2～2.0 mm,在冷冻干燥器中冻干12 h.在10 g/L Triton X-100、Tris-HCI液内加入蛋白酶抑制剂-苯甲基黄酰氟,持续振荡48 h后标本以双蒸馏水连续冲洗后置于DNase I酶和RNase A酶混合液中消化.置于10 g/L Triton X-100、Tris-HCI液中洗脱.实验评估:①大体观察:肉眼观察脱细胞后关节软骨的外观形态.②组织学观察:将制备的脱细胞关节软骨行石蜡包埋切片,行苏木精-伊红染色、Massion三色染色并在光镜下观察.③扫描电镜观察:将制备的脱细胞关节软骨以戊二醛-锇酸双固定后,行扫描电镜观察.结果:①脱细胞后关节软骨外观形态:肉眼下可见正常关节软骨呈白色或淡黄色,脱细胞后关节软骨色呈灰白,半透明状,无光泽,外形与软骨相似并且仍维持了关节软骨的结构.②脱细胞后关节软骨的组织学变化:苏木精-伊红染色显示,软骨细胞消失,软骨巢分辨不清,在巢内没有蓝染的核物质,核细胞碎屑,只有红染为残留的细胞外基质.Massion三色染色显示,脱细胞后关节软骨内主要含有胶原纤维.③脱细胞后关节软骨的超微结构:扫描电镜下显示,脱细胞后关节软骨陷窝呈蜂窝状,未见到残余的细胞核、细胞器,残余的空穴高低不平.结论:经冷冻干燥、化学去污剂等方法可完整去除软骨中的细胞成分,保留胶原纤维等细胞外基质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵斌	兰州大学第二医院骨科研究所	40	126	8.0	9.0
2	王栓科	兰州大学第二医院骨科研究所	109	564	13.0	17.0
3	夏亚一	兰州大学第二医院骨科研究所	142	884	15.0	23.0
4	赵琳	兰州大学第二医院骨科研究所	35	189	7.0	13.0
5	汪静	兰州大学第二医院骨科研究所	64	287	10.0	14.0
6	张海鸿	兰州大学第二医院骨科研究所	32	130	7.0	9.0
7	武天佑	兰州大学第二医院骨科研究所	2	20	1.0	2.0
8	王翠芳		1	0	0.0	0.0