人α-防御素基因的克隆及其在293T细胞中表达的临床意义

• 作者: 王峰 黄璐圆
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 防御素 293T细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-12
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2008字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2007.23.004

摘要

目的 克隆人α-防御素(α-HNP)基因,构建重组真核表达质粒pCG-HNP并检测其在293T细胞中的表达.方法 提取人PBMC细胞的RNA,以其为模板用RT-PCR技术克隆人α-HNP的cDNA,并将其插入质粒pCG中构建真核表达载体.测序证实后,将重组质粒用脂质体法转染293T细胞,用蛋白质免疫印迹法(Western)检测目的蛋白分子的表达.结果 测序证实克隆的人α-HNP阅读框正确完整,PCR鉴定和酶切鉴定证实插入方向正确,免疫印迹结果显示重组质粒能够在293T细胞中表达HNP-GFP-Flag融合蛋白.结论 α-HNP基因成功克隆;其在293T细胞中的表达可为进一步研究其抗HIV活性奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王峰	暨南大学药学院基因组药物研究所	33	133	7.0	10.0
2	黄璐圆	中国科学院广州生物医药与健康研究院分子医学中心	5	15	2.0	3.0