携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体重组腺相关病毒的构建及鉴定

• 作者: 伍兆锋 夏金堂 徐波 李书华 李雯 王劭晟 赖越元
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体 腺相关病毒 基因治疗
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 1966-1968,1971
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.10.052

摘要

目的:构建一种携带肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因的重组腺相关病毒(recombined adeo-associated virus,rAAV)载体.方法:实验于2005-09/2006-04在中山大学附属第一医院普通外科实验室完成.首先构建携带可溶性肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体基因的穿梭质粒pAAV-sTRAIL,利用磷酸钙共沉淀法将穿梭质粒共转染入HEK293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-sTRAIL.以噬斑分析法筛选单克隆重组腺相关病毒;聚合酶链反应法鉴定阳性重组腺相关病毒;氯化铯密度梯度离心法纯化病毒;紫外分光光度仪测定病毒颗粒数及纯度,噬斑分析法测定病毒感染滴度;Western blot检测rAAV-sTRAIL在293细胞中的表达情况.结果:成功构建了重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL,制备的病毒纯度好、滴度高,且在293转导细胞中能有效表达目的基因sTRAIL.结论:构建的重组腺相关病毒载体rAAV-sTRAIL,为组织工程相关细胞转基因构建及临床应用提供先进的载体系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏金堂	广州市第一人民医院普外科	37	161	7.0	11.0
2	徐波	广州市第一人民医院普外科	68	214	7.0	11.0
3	李雯	中山大学附属第一医院普通外科实验室	50	259	10.0	13.0
4	王劭晟	广州市第一人民医院普外科	12	42	4.0	6.0
5	赖越元	广州市第一人民医院普外科	14	47	4.0	5.0
6	伍兆锋	广州市第一人民医院普外科	11	37	4.0	5.0
7	李书华	广州市第一人民医院普外科	1	6	1.0	1.0