人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中构建组织工程软骨

• 作者: 卢世璧 孙明学 康红军 张莉 袁玫 许文静 赵斌 郭全义
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪干细胞 生物反应器 支架 软骨
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 组织工程化骨及软骨构建
• 页码范围: 1801-1804,1811
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.10.001

摘要

目的:观察人脂肪干细胞复合脱细胞软骨基质支架在生物反应器中初步构建组织工程软骨的可行性.方法:实验于2005-04/2006-05在解放军总医院骨科研究所完成.脂肪组织和关节软骨均来自膝关节置换术中切除的组织,并经患者知情同意.关节软骨冻干后经粉碎机粉碎,过筛,选取25～38 μm大小的软骨微粒.在样品中先加入2.5 g/L胰蛋白酶,37℃消化24 h,再加入1%Triton X-100震荡72 h.将软骨微粒和蒸馏水按1:3的比例混合后滴加在模板中,置入冷冻干燥机冻干后行紫外线交联.紫外线照射8 h完成.最后经25 kGy 60Co辐照灭菌完成支架制备.取膝关节置换术中切除的髌下脂肪挚,酶消法获得脂肪干细胞,扩增后复合于脱细胞软骨基质制成圆柱状三维支架上(细胞密度5×1010 L-1),置于生物反应器中进行诱导培养,同时设静态培养组作为对照,3周后观测大体形态和组织学形态变化,同时进行组织化学(包括番红花O,阿利新蓝染色)和Ⅱ型胶原免疫组织化学分析.结果:生物反应器组诱导培养3周苏木精-伊红染色显示支架结构消失,只有中心区域残存少量支架结构;静态培养组支架结构尚存在,有少量基质分泌.番红花O染色显示生物反应器组细胞外有大量蛋白聚糖沉积,阿利新蓝染色表明有软骨特异性蛋白多糖的聚集;而静态培养组只有部分区域染色且淡于生物反应器组.Ⅰ型胶原免疫组化的结果显示,在生物反应器组细胞能够合成大量软骨细胞特异性胶原成分,而静态培养组呈弱阳性.结论:生物反应器培养明显促进了脂肪干细胞的增殖与软骨分化,是体外构建组织工程软骨的良好方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁玫	解放军总医院骨科研究所	45	314	10.0	16.0
2	张莉	解放军总医院骨科研究所	73	453	13.0	18.0
3	郭全义	解放军总医院骨科研究所	46	278	10.0	14.0
4	赵斌	解放军总医院骨科研究所	79	719	15.0	23.0
5	卢世璧	解放军总医院骨科研究所	204	1711	21.0	30.0
6	许文静	解放军总医院骨科研究所	62	428	12.0	17.0
7	孙明学	解放军总医院骨科研究所	49	512	12.0	20.0
8	康红军	解放军总医院骨科研究所	41	329	10.0	17.0