人脂肪间充质干细胞生物学特征及体外向类角质细胞的分化

• 作者: 乔群 何利娟 王先成 王韫芳 管利东 裴雪涛
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪抽吸物 间充质干细胞 细胞分化 角质样细胞
• 年，卷（期）: 2007,（37）
• 所属期刊栏目: 干细胞生物学特征
• 页码范围: 7333-7336
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4935字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2007.37.004

摘要

目的:在体外不同培养条件下,脂肪来源间充质干细胞可以向成骨细胞、成软骨细胞、神经细胞、内皮细胞、肌肉细胞、脂肪细胞和肝脏细胞等不同胚层来源的细胞分化.观察脂肪间充质干细胞在体外培养并向类角质细胞分化的能力.方法:实验于2005-06/2006-03在解放军军事医学科学院完成.实验方法:取20～45岁健康女性(已取得患者同意)脂肪组织行脂肪抽吸术后的脂肪颗粒.参照Zuk等方法分离脂肪间充质干细胞.取培养的第3代细胞,采用流式细胞仪鉴定细胞表面分子及细胞周期.取状态良好、融合至瓶底80%的第20代细胞,在5 mg/L的秋水仙素处理后采集分裂细胞,以Giemsa染色进行核型分析.取第3代细胞以5 μm维甲酸和5 μg/L表皮细胞生长因子培养基向角质细胞诱导分化.对照组用含体积分数为0.05胎牛血清的L-DNMEM培养基.实验评估:采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫组织化学方法检测角质细胞的标志物CK19.结果:①脂肪来源间充质干细胞表面分子CD29、CD90、CD44呈阳性,而CD34呈阴性.②细胞增殖曲线呈S型,接种的前3 d细胞处于滞留期,3 d后进入对数生长期,6 d后进入平台期,细胞的群体倍增时间约为29 h.处于对数生长期的细胞80%以上处于G0和G1期.③细胞染色体核型分析显示,染色体数目2n=46,核型46,xx,为女性正常核型.④对照组细胞贴壁后,呈成纤维细胞样,细胞呈长梭形,排列成漩涡状,贴壁较好.诱导组从诱导的第3天开始,细胞逐渐变成不规则,诱导第10天出现铺路石改变,形似角质细胞.⑤免疫组织化学方法检测显示,部分细胞专一地对CK19抗体呈阳性反应,有棕色染色.结论:可从人脂肪抽吸物中分离出间充质干细胞,脂肪间充质干细胞在体外一定条件下可向类角质细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王先成	中南大学湘雅二医院烧伤整形外科	35	96	6.0	8.0
2	乔群	中国医学科学院北京协和医院整形外科	48	363	11.0	17.0
3	管利东	解放军军事医学科学院输血研究所干细胞研究中心	2	7	1.0	2.0
4	王韫芳	解放军军事医学科学院输血研究所干细胞研究中心	2	7	1.0	2.0
5	裴雪涛	解放军军事医学科学院输血研究所干细胞研究中心	17	37	3.0	6.0
6	何利娟	解放军军事医学科学院输血研究所干细胞研究中心	1	6	1.0	1.0