甘蓝型油菜BnKCR2基因cDNA的克隆和真核表达载体的构建

• 作者: 刘绵学 李旭锋 杨毅 王慧 王茂华
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: BnKCR2基因 真核表达载体 载体构建
• 年，卷（期）: 2007,（23）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 7105-7107
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2409字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2007.23.023

摘要

[目的]为了克隆甘蓝型油菜的BnKCR2基因,并构建其真核表达载体,以期得到高芥酸含量的油菜.[方法]根据GenBank中甘蓝型油菜3-酮酯酰-CoA还原酶(BnKCR2)的cDNA序列设计引物,提取蜀杂九号油菜叶片的总RNA,进行RT-PCR扩增,将产物与TA克隆载体pMD18-T连接,通过中间载体pMD18-T和pBluescript将BnKCR2分别正向、反向导入pBI121质粒载体,构建BnKCR2基因的正向和反向表达质粒.[结果]通过甘蓝型油菜总RNA的RT-PCR扩增,成功克隆到一个960 bp的BnKCR2基因;重组质粒pMD18-BnKCR2测序结果与NCBI中甘蓝型油菜cDNA(AY196197)序列的相似性达99%;而蛋白质序列仅有1个氨基酸之差,且蛋白质天然构象未改变,BnKCR2是反向连接克隆.[结论]通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌,为通过根癌农杆菌介导法将BnKCR2基因导入油菜奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭锋	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	68	338	10.0	13.0
2	杨毅	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	121	269	7.0	9.0
3	王慧	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	36	135	5.0	10.0
4	王茂华	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	17	21	3.0	4.0
5	刘绵学	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	4	13	3.0	3.0