摘要:
目的:观察中药复方膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其相关机制.方法:实验于2005-09/2006-07在南方医科大学细胞生物实验室完成.膈下逐瘀汤(按<医林改错>方组成:五灵脂6 g,当归9 g,川芎6 g,桃仁9 g,丹皮6 g,赤芍6 g,乌药6 g,延胡索3 g,甘草9 g,香附5 g,红花9 g,枳壳5 g.均购自南方医院中药房)经研粉、煮沸、离心、过滤配成质量浓度为25,50,100,200 mg/L的药液;顺铂配制成质量浓度为0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L的药液(作为阳性对照),均作用于Bel-7402细胞,并设空白对照(未加任何药物).采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)比色法检测膈下逐瘀汤各组对Bel-7402细胞生长的影响,用酶标仪测定培养细胞在600 nm处吸光度值,并计算细胞抑制率,抑制率(%)=(实验组吸光度值-对照组吸光度值/对照组吸光度值)×100%.用蛋白印迹试验检测不同质量浓度药物作用48,72 h时第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达水平.结果:①中药复方膈下逐瘀汤对Bel-7402细胞增殖的影响:膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞有明显的生长抑制作用,呈良好的剂量-效应关系.膈下逐瘀汤质量浓度在200 mg/L时其48 h细胞生长抑制率介于0.5 mg/L顺铂组与1.0 mg/L顺铂组之间(分别为41.27%,34.01%,47.49%);膈下逐瘀汤质量浓度在50,25 mg/L时,其细胞抑制率明显低于顺铂组,72 h细胞抑制率结果基本相同.②药物作用肝癌Bel-7402细胞48 h后第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达增多,200 mg/L膈下逐瘀汤组介于0.5 mg/L顺铂组和1.0 mg/L顺铂组之间.结论:中药复方膈下逐瘀汤抑制Bel-7402细胞的增殖机制可能是第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因表达增多的原因.