重组腺病毒突变型人低氧诱导因子1α调节细胞周期的分子机制

• 作者: 吴平生 唐其东 王月刚 胡英芳 赖艳娴 陈娓 韦莉莉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 HIF-1α p21WAF1/CIP1 细胞周期停滞
• 年，卷（期）: 2008,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3814-3817
• 页数: 4页
• 分类号: R392.114
• 字数: 4980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.20.016

摘要

背景:目前研究显示低氧诱导因子1α可诱导细胞周期停滞,但其机制尚不清楚.目的:研究重组腺病毒突变型人低氧诱导因子1α (Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803)调节细胞周期的分子机制.设计、时间及地点:对照实验,于2007-03/12在南方医科大学中医实验中心完成.材料:人结肠腺癌细胞株LoVo细胞由南方医院消化内科实验室提供;重组腺病毒Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803和对照病毒Ad-lacZ载体为自行构建.方法:将重组腺病毒Ad-HIF-1α-Ala564-Ala803和对照病毒Ad-lacZ在HEK293A细胞中扩增,测定病毒滴度,然后在常氧下以感染复数10,20,30,40,50,60,70,80,90,100感染LoVo细胞.主要观察指标:X-gal染色检测重组腺病毒对LoVo细胞的感染效率;荧光定量PCR检测不同时间点低氧诱导因子1α与p21WAF1/CIP1的mRNA表达水平;MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期的变化.结果:①重组腺病毒扩增后能获得较高的滴度,在LoVo细胞中具有很高的感染效率,感染效率与感染复数成量效关系,当感染复数为60时,感染效率为90%以上.②随低氧诱导因子1α表达的增高,p21WAF1/CIP1的表达也相应增高,两者存在正相关(r=0.945, P＜0.05).③与对照病毒相比,重组腺病毒感染后LoVo细胞增殖轻度受抑;细胞周期示G1期细胞明显增加,S期的细胞显著减少(P＜0.05).结论:①重组腺病毒载体介导的人HIF-1α-Ala564-Ala803基因可有效地转染LoVo细胞并成一定的量效关系.②低氧诱导因子1α在细胞周期的调节中发挥重要的作用,可能通过上调p21WAF1/CIP1的表达,诱导细胞周期停滞于G1期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴平生	南方医科大学南方医院心内科	131	614	13.0	18.0
2	王月刚	南方医科大学南方医院心内科	48	237	8.0	12.0
3	胡英芳	南方医科大学南方医院心内科	8	32	4.0	5.0
4	赖艳娴	南方医科大学南方医院心内科	5	25	3.0	5.0
5	韦莉莉	南方医科大学南方医院心内科	5	23	3.0	4.0
6	陈娓	南方医科大学南方医院心内科	6	16	3.0	3.0
7	唐其东	南方医科大学南方医院心内科	3	44	3.0	3.0