菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒EP-1-like基因克隆、原核表达与多克隆抗体制备方法

• 作者: 刘鹏程 孟祥锋 时敏 陈亚锋 陈学新 黄芳
• 来源期刊: 环境昆虫学报
• 学科: 农学
• 关键词: CvBV EP-1-like 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: S476
• 字数: 4990字
• 语种: 中文

摘要

本实验提取被菜蛾盘绒茧蜂寄生后24 h的小菜蛾幼虫体内总RNA,反转录合成cDNA,以此为模板PCR扩增出菜蛾盘绒茧蜂多分DNA病毒(Cotesia vestalis polydnavirus,CvBV)EP-1-like基因,将其分别克隆到表达载体pET30a、pET28a中,转化宿主菌BL21(DE3),获得单克隆重组质粒pET-30a-EPIL和pET-28a-EP1L.经IPTG诱导,pET-28a-EP1L成功表达了约34.8 kDa的包涵体蛋白.将诱导条件优化以后,采用割胶回收的方法纯化包涵体,将纯化后的表达蛋白免疫新西兰大耳兔制备多克隆抗体.ELISA分析表明制备的抗体效价达1:128000,Westernblot检测证明抗体具有良好的免疫反应特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈学新	浙江大学昆虫科学研究所	133	1381	21.0	31.0
2	黄芳	浙江大学昆虫科学研究所	51	316	10.0	16.0
3	时敏	浙江大学昆虫科学研究所	16	62	6.0	7.0
4	孟祥锋	浙江大学昆虫科学研究所	6	69	4.0	6.0
5	刘鹏程	浙江大学昆虫科学研究所	6	70	4.0	6.0
6	陈亚锋	浙江大学昆虫科学研究所	3	48	3.0	3.0