多个发夹RNA的混合使用抑制O型和AsiaⅠ型口蹄疫病毒的复制

• 作者: 丛薇 严维耀 刘明秋 郑兆鑫 金虹 陈九连 高艳华
• 来源期刊: 复旦学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 口蹄疫病毒 RNA干扰 发夹RNA(shRNA) 保守序列 交叉抑制
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 页码范围: 545-552
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 6180字
• 语种: 中文

摘要

通过对国内流行的口蹄疫病毒(FMDV)毒株的序列分析,锁定RNA干扰的3个目标基因即3D,VP4和2B, 分别编码聚合酶POL,病毒结构蛋白VP4和非结构蛋白2B,这3个靶基因序列在不同流行毒株之间相对保守.分别设计合成靶向这些基因序列的发夹RNA(short-hairpin RNA,shRNA)表达模板,构建了5个shRNA表达质粒p3D-NT56,p3D-NT19,pVP4-NT65,pVP4-NT19和p2B-NT25.进行单独应用或混合应用,于细胞水平和乳鼠水平检测其抗病毒活性.结果显示,3D-NT56/19,VP4-NT65/19和2B-NT25 shRNA对O型FMDV均有抑制作用,但是对AsiaⅠ型FMDV,仅2B-NT25 shRNA具有较显著的抑制作用.3个shRNA表达质粒的混合使用(p3D-NT56+pVP4-NT65+p2B-NT25,p3D-NT19+pVP4-NT19+p2B-NT25),不仅能够交叉抑制不同血清型FMDV的复制,而且这种抑制作用较单一shRNA延续更长的时间.