PCV2 ORF2基因在大肠杆菌中的表达及ELISA检测方法的建立

• 作者: CAO Yong-chang WANG Xian-wen XIE Qing-mei 于康震 毕英佐 王新卫
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒Ⅱ型 ORF2基因 酶联免疫吸附试验 表达
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 697-700
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6|R446.61
• 字数: 3348字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.08.011

摘要

采用PCR扩增了猪圆环病毒Ⅱ型广东分离株的ORF2 3'端基因,将其连接到pET32a(+)质粒上并转化DH5a细胞,重组质粒经PCR和酶切鉴定并测序后,转化BL21菌,用1 mmol/L IPTG诱导表达重组菌.经sDS-PAGE和Western-blot分析,表明ORF2基因已在大肠杆菌中正确表达,表达的融合蛋白的分子质量约为33 ku;表达产物经超声波处理后,用Ni-NTA柱纯化,复性,用此纯化产物包被酶标板,建立了ELISA诊断方法,经对临床516份血清样品进行检测,结果表明仔猪的血清阳性率为35.2%,育肥猪的血清阳性率为60.6%,种猪的血清阳性率为69.8%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毕英佐	华南农业大学动物科学学院	216	2631	28.0	41.0
2	于康震	华南农业大学动物科学学院	6	27	3.0	5.0
3	王新卫	华南农业大学动物科学学院	13	52	5.0	6.0
4	XIE Qing-mei	华南农业大学动物科学学院	2	42	2.0	2.0
5	WANG Xian-wen	华南农业大学动物科学学院	1	5	1.0	1.0
6	CAO Yong-chang	华南农业大学动物科学学院	1	5	1.0	1.0