非小细胞肺癌T7噬菌体展示文库的构建

• 作者: 岳文涛 张丽娜 王子彤 王钥
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示 cDNA文库 肺肿瘤 SEREX
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 686-690
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2008.05.003

摘要

背景与目的 SEREX(Serological analysis of recombinant expression libraries)是近年来发展起来的一种寻找肿瘤相关抗原的方法.通过与噬菌体展示技术结合,可以有效和快速的筛选肿瘤相关抗原.本研究拟构建人肺鳞癌和肺腺癌T7噬菌体展示eDNA文库,为进一步筛选和鉴定非小细胞肺癌相关抗原打下基础.方法 诊断明确的肺鳞癌和腺癌患者手术标本各5例,Trizol试剂提取总RNA,Straiight A's系统分离鳞癌和腺癌mRNA,逆转录合成双链cDNA后.与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到人肺鳞癌和腺癌T7噬菌体展示cDNA文库.结果 构建肺鳞癌和肺腺癌T7噬菌体展示cDNA文库各一个,原始文库重组克隆数分别为鳞癌1.8×106 pfu,腺癌5×106 pfu.扩增后滴度为3.2×1010pfu/mL和2.5×1010pfu/mL.随机从2个文库中各抽取24个克隆PCR扩增插入片断.电泳结果显示肺腺癌文库所有克隆均有插入片段,肺鳞癌文库插入率超过95%(23/24).两个文库插入片断大小均在(300-1500)bp之间.结论 成功构建了人肺鳞癌和腺癌,T7噬菌体展示cDNA文库,为下一步筛选和鉴定非小细胞肺癌相关基因奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳文涛	北京市结核病胸部肿瘤研究所细胞生物学研究室	16	68	6.0	7.0
2	张丽娜	北京市结核病胸部肿瘤研究所细胞生物学研究室	3	9	2.0	3.0
3	王钥	北京市结核病胸部肿瘤研究所细胞生物学研究室	1	6	1.0	1.0