昆明种小鼠胚胎神经干细胞的分离及培养

• 作者: 刘琦 孙莉 宫晓洁 袁路 陈维平 黎靖宇
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 神经球 细胞培养 碱性成纤维细胞生长因子 表皮细胞生长因子
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1477-1480
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4780字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.08.027

摘要

目的:在神经干细胞的分离培养过程中,国内外的报道多数是用胰蛋白酶对组织细胞进行消化,但是消化时间比较难把握.采用胰酶消化与机械分离法相结合的方式对昆明种小鼠胚胎脑神经干细胞进行分离、培养和初步的免疫组织化学检测,为相关研究建立实验条件.方法:实验于2006-10/2007-09在广西医科大学基础医学实验室完成.实验室为广西重点实验室、基础医学博士后工作站. ①实验材料:孕14～16 d的昆明种小鼠由广西医科大学实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:分离昆明种小鼠胎鼠的脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,在加入碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的B27无血清培养基中培养.③实验评估:用免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞.结果:在无血清DMEM/F12培养液中,加入碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子及B27的条件下,培养24 h后可见细胞以悬浮方式生长,三五聚集成团块,48 h后形成由十数个至数十个细胞组成的,大小不等的细胞球,形态规则,细胞无突起,形成典型的神经球,可传代.免疫细胞化学法检测显示,细胞表达神经巢蛋白.结论:①来自昆明种小鼠胎脑的神经干细胞能在体外培养、增殖并具有增殖传代能力.②无血清B27培养基添加表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子有利于神经干细胞的体外培养和促进其增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙莉	桂林医学院组胚教研室	72	304	9.0	13.0
2	陈维平	广西医科大学组胚教研室	67	301	10.0	13.0
3	宫晓洁	桂林医学院组胚教研室	31	104	7.0	8.0
4	袁路	广西医科大学组胚教研室	4	17	2.0	4.0
5	黎靖宇	广西医科大学组胚教研室	3	26	2.0	3.0
6	刘琦	广西医科大学组胚教研室	4	15	2.0	3.0