创伤弧菌溶细胞素融合蛋白细胞毒活性相关分子机制研究

• 作者: 严杰 朱晔晶 桂静 楼永良 肖美英 肖翔 胡蝶 郑丽
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 创伤弧菌 溶细胞素 rVVC 人ECV304 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 390-394
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4570字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0254-5101.2008.05.002

摘要

目的 研究创伤弧菌溶细胞素融合蛋白(rVVC)诱导人ECV304细胞(人脐静脉内皮细胞)凋亡过程中Caspase-3,-8,-9活性变化.方法 应用MTT法、Hochest33342/PI荧光双染、流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳分析rVVC对人ECV304细胞诱导凋亡的影响;比色法测定rVVC诱导人ECV304凋亡过程中Caspase-3,-8,-9活性变化.结果 MTT结果显示rVVC具有降低人ECV304细胞的存活率活性;浓度为2.0溶血单位(HU)/ml的rVVC作用人ECV304 12 h后,其诱导凋亡的活性高于对照组和浓度为0.5 HU/ml的 rVVC处理组,具有剂量依赖性;浓度为2.0 HU/ml rVVC处理组加40 μmol/L Caspase全酶抑制剂(Z-VAD-FMK)后凋亡率较2.0 HU/ml rVVC处理组有一定程度降低.浓度为2.0 HU/ml rVVC处理人ECV304细胞0.5 h后Caspase-3活性开始增高,于3 h达高峰,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),Caspase-8,-9活性无明显变化.结论 rVVC对人ECV304具有凋亡诱导的生物学活性,Caspase-3可能与活性rVVC诱导的人ECV304凋亡有关.