My027融合蛋白表达载体构建及其在大肠杆菌的表达

• 作者: 刘优萍 李晓华 罗敏 郑升 骆天红
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 蛋白My027 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 739-742,封底
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 语种: 中文

摘要

目的 探索My027蛋白的体外表达,通过原核表达获得大量可溶性My027融合蛋白. 方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-My027.转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法获得融合蛋白,采用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)、Western印迹法及质谱进行鉴定. 结果 融合蛋白以水溶形式分泌于大肠杆菌BL-21胞质中,纯化后的目的蛋白经SDS-PAGE、Western印迹法及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确. 结论 人脂肪细胞新蛋白My027在pGEX-4T-2原核表达载体可获高效表达,为进一步研究其功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗敏	上海交通大学附属第一人民医院内分泌科	41	207	9.0	13.0
2	李晓华		1	0	0.0	0.0
3	郑升		1	0	0.0	0.0
4	刘优萍		1	0	0.0	0.0
5	骆天红		1	0	0.0	0.0