猪肺炎支原体P97基因随机肽库的构建

• 作者: 张映 李丽芳 聂向庭 贾球锋
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体 P97基因 随机肽库 随机片段
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 608-612
• 页数: 5页
• 分类号: S852.62
• 字数: 4431字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2008.05.007

摘要

目的:构建能用于抗原表位筛选的猪肺炎支原体(Mhp)P97基因C-端序列噬菌体随机肽库.方法: 以Mhp Z株(强毒)基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得Mhp P97基因的C-端部分序列,扩增产物用DNaseⅠ消化并回收50 bp～100 bp的随机片段,将回收的随机片段插入pC89pⅧ型噬菌粒载体中,转化大肠杆菌XL1-Blue,辅助噬菌体VCSM13超感染,使P97基因随机片段以融合蛋白的形式展示于噬菌体表面, 从而成功构建了P97基因特异性噬菌体随机肽库.用PCR及DNA测序法鉴定所建文库的随机性和多样性,测定肽库的滴度并计算库容量.结果: 所建肽库的容量约为1.8×104,滴度约为1.3×1012 TU/mL,PCR检测及DNA测序结果显示插入片段具有随机性和多样性.结论: 所建随机肽库具有较好的随机性和多样性,能够满足后续的抗原表位筛选,为进一步的深入研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张映	山西农业大学动物科技学院	99	842	13.0	24.0
2	聂向庭	山西农业大学动物科技学院	20	111	7.0	10.0
3	贾球锋	山西农业大学信息学院	7	19	2.0	4.0
4	李丽芳	山西农业大学信息学院	10	28	3.0	5.0