大鼠小肠转化生长因子β1重组腺病毒载体的构建和表达

• 作者: 刘骥 季刚 李纪鹏 杜建军 王为忠 董光龙 陈冬利 黄怡
• 来源期刊: 中华胃肠外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β 腺病毒载体 小肠 树突细胞,大鼠
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 76-79
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3135字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0274.2008.01.020

摘要

目的 构建可调控性大鼠小肠TGF-β1表达的重组腺病毒载体.方法 按RNA提取试剂(TRIzol Reagent)说明书步骤从大鼠小肠组织抽提总RNA,克隆TGF-β1基因;经穿梭载体与可调控性腺病毒载体骨架连接,鉴定后在HEK293细胞包装.获得高滴度病毒后,取上清检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达,观察目的 基因的表达情况.结果 扩增出与预期大小一致的cDNA片段,其中TGF-β1大小为1173 bp;其基因序列与GenBank登录的大鼠TGF-β1基因序列完全一致.重组TGF-β1腺病毒获得的滴度约为1012 PFU/ml;病毒包装后绿色荧光蛋白表达的检测结果显示,绿色荧光蛋白随着时间的延长,表达量逐渐增高;与预期结果一致.结论 构建的可调控性大鼠小肠TGF-β1重组腺病毒载体得到了正确表达,为进一步研究TGF-β1干扰树突状细胞分化成熟诱导小肠移植免疫耐受提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王为忠	第四军医大学西京医院胃肠外科	213	963	15.0	19.0
2	季刚	第四军医大学西京医院胃肠外科	37	224	9.0	13.0
3	董光龙	第四军医大学西京医院胃肠外科	69	280	9.0	13.0
4	黄怡	第四军医大学西京医院胃肠外科	27	137	7.0	10.0
5	陈冬利	第四军医大学西京医院胃肠外科	56	216	7.0	11.0
6	李纪鹏	第四军医大学西京医院胃肠外科	36	174	7.0	11.0
7	杜建军	第四军医大学西京医院胃肠外科	23	156	7.0	12.0
8	刘骥	第四军医大学西京医院胃肠外科	4	3	1.0	1.0