应用联合酶建立BALB/c鼠枯否氏细胞体外分离培养方法

• 作者: 严茂林 周总光 廖大清 郑雪莲 陈珂玲
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 联合酶 枯否氏细胞 分离 BALB/c 鼠
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 298-301
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.11
• 字数: 4028字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2008.02.035

摘要

目的 用作用功效不同的酶联合消化分离 BALB/c 鼠枯否氏细胞(KC),建立简便易行,产量、活性,纯度较稳定的 KC 分离培养方法.方法 将0.1%Ⅳ型胶原酶、0.2%链霉蛋白酶、0.01%Dnase Ⅰ酶按1:1:1比例混合原位灌注和离体消化肝组织,经 Percoll 梯度离心,贴壁培养纯化细胞,应用荧光显微镜观察、免疫组织化学染色、吞噬功能实验进行鉴定.结果 KC获得率为(2～3)×106/鼠肝,细胞存活率达 96%,免疫组化和吞噬实验鉴定细胞纯度达 92%.KC 贴壁后形态大小不规则,呈多角形或星形,免疫组织化学染色显示溶菌酶阳性,胞浆内见吞噬的碳素墨汁颗粒.结论 用作用功效不同的酶联合消化KC,经梯度离心和贴壁培养,可获得高产量、高活性、高纯度的 BALB/c 鼠 KC,为进一步研究KC在肝脏疾病中的作用提供可靠的细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周总光	四川大学华西医院消化外科研究室	189	1320	18.0	26.0
2	廖大清	四川大学华西医院麻醉科研究室	28	40	4.0	4.0
3	郑雪莲	四川大学华西医院消化外科研究室	26	76	5.0	6.0
4	严茂林		1	5	1.0	1.0
5	陈珂玲	四川大学华西医院消化外科研究室	14	23	3.0	4.0