小干扰RNA技术下调视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50中Survivin基因表达的研究

• 作者: 张卉颖 张波 彭展 李永平 聂栋 聂莉
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜母细胞瘤 细胞系,肿瘤 RNA,小分子干扰 细胞凋亡 微管相关蛋白质类
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 906-911
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 6082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-4081.2008.10.010

摘要

目的 应用RNA干扰(RNAi)技术沉默视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50中凋亡抑制因子Survivin的表达,观察其干扰效果及对细胞的影响.方法 实验研究.体外化学法合成针对人Survivin基因的特异性小干扰RNA(siRNA)和对Survivin基因无沉默效果的阴性对照siRNA,利用转染试剂分别将siRNA转入SO-Rb50细胞株,通过半定量RT-PCR和Western blot检测其对SO-Rb50细胞中Survivin基因和蛋白表达的抑制作用,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度siRNA对细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测转染后细胞凋亡率和细胞周期改变,荧光显微镜下观察细胞凋亡形态.对多组间数据比较采用单因素方差分析,处理组与对照组比较采用Dunnett-t检验.结果 Survivin特异性siRNA转染细胞24 h后Survivin mRNA和蛋白表达水平明显下调,对照组中其表达则无明显改变.MTT法结果显示Survivin特异性siRNA浓度为35、70、100 nmol/L时均对SO-Rb50细胞增殖具有抑制作用(P＜0.05),且具有剂茸依赖性.流式细胞仪检测发现Survivin特异性siRNA组出现凋亡亚二倍体峰,细胞被阻滞于G0/G1期,较对照组增加了8.11%,G2/M期细胞比例减少了5.75%,S期细胞仅减少了2.26%.荧光显微镜下可见部分细胞出现染色质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡形态学变化.结论 针对Survivin的RNA干扰技术可有效地下调SO-Rb50细胞中Survivin基因表达,进而抑制SO-Rb50细胞增殖和诱导其凋亡,为视网膜母细胞瘤的基因治疗提供了重要的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张波	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	84	457	11.0	16.0
2	李永平	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	57	194	8.0	9.0
3	张卉颖	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	4	18	2.0	4.0
4	彭展	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	6	2	1.0	1.0
5	聂莉		5	18	3.0	4.0
6	聂栋	北京大学深圳医院中心实验室	2	2	1.0	1.0