靶向着丝粒蛋白A的小RNA干扰对肝癌细胞株HepG2细胞生物学行为的影响

• 作者: 史敏 朱明华 李咏梅 祝峙 罗志刚 陈颖
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 RNA,小分子干扰 细胞凋亡 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 124-128
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-5807.2008.02.012

摘要

目的 研究靶向着丝粒蛋白A(CENP-A)的siRNA对肝癌细胞株HepG2细胞生物学行为的影响.方法 设计并合成三对CENP-A编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体pSilencerTM 2.1-U6 neo,构建siRNA真核表达质粒,经稳定转染HepG2细胞后检测肝癌细胞中CENP-A基因mRNA及蛋白质表达的抑制情况;通过观察HepG2细胞生长、凋亡、细胞周期和平板克隆形成能力评价CENP-A基因干扰对细胞生物学行为的影响;通过检测bcl-2、Bax、p21waf1、mdm2、p53蛋白表达水平初步探讨CENP-A生物学作用的可能机制.结果 三对靶向CENP-A的siRNA干扰片段中有二对抑制效果明显.与未转染组及空载体组相比,转染CENP-A干扰片段的细胞生长减慢,平板克隆形成率下降.细胞周期检测显示,G1期阻滞(P＜0.01),S期细胞比例减少(P＜0.001).细胞凋亡比例增加(P=0.003),并伴随bcl-2蛋白表达明显下降(P=0.000),Bax蛋白表达明显增高(P=0.001).还可致p21waf1表达增高,mdm2表达下降,但对野生型p53表达未显示明显影响.结论 CENP-A通过参与细胞周期调控而密切相关于细胞恶性增殖和凋亡抑制,其机制可能涉及野生型p53非依赖性通路和凋亡相关基因bcl-2Bax的表达异常.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱明华	第二军医大学长海医院病理科	175	988	15.0	23.0
2	陈颖	第二军医大学长海医院病理科	50	320	9.0	16.0
3	祝峙	第二军医大学长海医院病理科	32	269	8.0	15.0
4	史敏	第二军医大学长海医院病理科	6	25	3.0	5.0
5	罗志刚	第二军医大学长海医院病理科	6	38	4.0	6.0
6	李咏梅	上海同济大学医学院	1	5	1.0	1.0