小干扰RNA在心肌细胞中对柯萨奇病毒B3复制的抑制作用研究

• 作者: 任红雁 何峰 刘哲伟 姚海兰 肖宗慧 韩继生 鲁杰
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 柯萨奇B组病毒(CVB) 病毒性心肌炎 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 320-324
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4118字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0254-5101.2008.04.008

摘要

目的 通过在原代心肌细胞培养上研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)介导的基因干扰对病毒增殖的抑制和细胞内免疫清除作用,评价siRNA在治疗病毒性感染中的可能性.方法 体外制备BALB/c乳鼠心肌细胞,利用脂质体和电穿孔转染方法转染siRNA后感染病毒,流式细胞术、中性红染色和病毒致细胞病变作用(CPE)保护实验评价转染效率和细胞生长状态,空斑形成减少实验、RT-PCR等方法检测抑制病毒程度.结果 通过在HeLa细胞上的筛选,针对病毒不同区域的siRNA呈现出不同的抗病毒作用,靶序列位于2B区的siRNA-3753能显著抑制柯萨奇病毒B3(CVB3)感染.在原代培养的心肌细胞中,转染siRNA-3753后同样显示出很好的抗病毒效果,心肌的搏动、心肌细胞的生长状况保持着较好的状态.而病毒对照和非特异性siRNA-non感染24 h后,细胞停止搏动,逐步变圆,皱缩死亡.测定培养上清和细胞内的病毒滴度,电转siRNA-3753对病毒抑制率可以达到98.1%,脂质体转染siRNA-3753对病毒抑制率为78.2%.电穿孔转染效率可以达到56.03%,脂质体为9.0%.结论 针对CVB3基因组2B区的siRNA在保护心肌细胞抵抗CVB3病毒感染实验中具有抑制病毒复制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁杰	首都儿科研究所分子免疫研究室	25	249	8.0	15.0
2	姚海兰	首都儿科研究所分子免疫研究室	15	20	3.0	4.0
3	何峰	首都儿科研究所分子免疫研究室	14	17	2.0	3.0
4	肖宗慧	首都儿科研究所分子免疫研究室	18	13	2.0	2.0
5	刘哲伟	首都儿科研究所分子免疫研究室	29	180	5.0	13.0
6	韩继生	首都儿科研究所分子免疫研究室	6	9	2.0	2.0
7	任红雁	首都儿科研究所分子免疫研究室	8	54	3.0	7.0