胶原-聚羟基乙酸支架与骨髓间质干细胞构建的组织工程肌腱

• 作者: 祁敏
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肌腱 胶原 骨髓 间质干细胞 组织工程
• 年，卷（期）: 2008,（32）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 6265-6269
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5872字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.32.024

摘要

背景:肌腱组织工程中应用的支架材料大致分为合成高分子材料和天然细胞外基质材料两类.目的:探讨用胶原-聚羟基乙酸复合材料作为支架材料,以家兔骨髓间质于细胞为种子细胞预构组织工程化肌腱重建兔跟腱的可能性.设计、时间及地点:单一样本观察,于2004-06/2005-06在中南大学湘雅医学院动物学部及湘雅医院中心实验室完成.材料:健康家兔6只,体质鞋1.0-1.5kg,雌雄不限:体质量250 g左右大白鼠1只用于Ⅰ型胶原溶液的制各.方法:以鼠尾胶原聚羟基乙酸为支架,将分离、培养的白体骨髓间质干细胞作为种子细胞,在体外混合培养后回植至兔跟腱缺损处,设为实验组.对照组以不含种子细胞的胶原-聚羟基乙酸支架修复肌腱缺损.主要观察指标:①骨髓间充质干细胞原代接种后5 d半量换液时在倒置显微下观察,并以CD44原位杂交检测该细胞.②组织工程化肌腱的体外构建结果.③于术后12周取移植处新生组织进行大体、组织细胞学观察,并做Ⅰ型和Ⅲ型胶原免疫组织化学染色.结果:原代细胞以CD44原位杂交显色,胞浆呈棕黄色,胞核经苏木精复染呈蓝色.提示为骨髓间充质干细胞.术后12周实验组新生组织与受体肌腱组织完好连接,呈条索状,与周围其他组织无粘连:组织学切片结果类似于正常肌腱组织:免疫组织化学染色示Ⅰ型胶原阳性,Ⅲ型胶原阴性.而对照组新生组织较细小、与周围组织有粘连;组织学切片示胶原纤维呈松散网丝状,细胞排列紊乱;免疫组织化学染色示Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性.结论:以胶原-聚羟基乙酸为支架,以自体骨髓间质干细胞作为种子细胞可望构建组织工程化肌腱.