枫香ISSR-PCR扩增条件的优化

• 作者: 叶文国 曾志成 李建辉 毕泉鑫 金则新
• 来源期刊: 福建林业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 枫香 ISSR 优化 遗传多样性
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 页码范围: 85-89
• 页数: 5页
• 分类号: Q943
• 字数: 2973字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-7351.2008.01.021

摘要

对浙江省天台山枫香自然种群的DNA进行提取和ISSR-PCR扩增条件的优化.分析了Mg2+浓度、4×dNTP浓度、BSA浓度、模板DNA用量、引物用量、Taq DNA聚合酶用量等对反应结果的影响.建立了适用于枫香ISSR分析最适宜的反应体系:10 μl PCR反应体积中,1 × Taq酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris-HCl,pH值9.0,50 mmol·L-1 KCl,0.1%TritonX-100),2.0 mmol·L-1 Mg2+,0.15 mmol·L-1 4×dNTP,2 mg·mL-1 BSA,10 ng模板DNA,6 pmol引物,0.9 U Taq DNA聚合酶,引物UBC808的最适退火温度为52.4℃.用此反应体系对天台山枫香自然种群进行了遗传多样性分析,结果显示其多态位点百分率为84.26%,Nei指数为0.2665,Shannon信息指数为0.4044,其遗传多样性处于较高水平.